ÖZAmaç: Toxoplasma gondii tüm dünyada olduğu gibi ülkemizde de görülen bir parazittir. Mortaliteye de sebep olabilen bu parazit, gebelerden bebeklere geçişi sebebiyle oldukça önemli bir halk sağlığı sorunu olarak görülmektedir. Toxoplasmosise karşı henüz efektif bir aşı geliştirilememiştir. SAG1 proteini parazitin hem bradizoit hem de takizoit dönemlerinde salgılanan, hastalığın patogenezinde önemi olan bir proteindir. Bu çalışmada DNA aşısı adayları arasında yer alan SAG1 geninin klonlanması amaçlanmıştır. Yöntemler: Çalışmada, T. gondii takizoitlerinden genomik DNA izolasyonu, SAG1 genini hedef alan primerler kullanılarak PCR ile SAG1 geni çoğaltılması, SAG1 geninin pJET1.2 vektörüne klonlanması, rekombinant plazmidin kompetan E. coli hücrelerine transformasyonu yapılmıştır. Rekombinant plazmidin varlığı PCR tarama ile doğrulanmıştır. Pozitif kolonilerdeki rekombinant plazmitler saflaştırıldıktan sonra klonlama; PCR, restriksiyon enzim kesimleri ve DNA dizi analizi yöntemleri ile doğrulanmıştır. Bulgular: SAG1 genine spesifik primerler kullanılarak yapılan PCR sonrasında 1010 baz çiftlik PCR ürünü görüntülendi. E. coli kompetan hüc-relerine transforme edilen rekombinant plazmid PCR-tarama ile gösterildi. Rekombinant plazmidin klonlanan geni içerdiği PCR ile gösterildi. DNA dizi analizi yapılarak, klonlanan genin DNA dizisi elde edildi. Sonuç: Toxoplasmosise karşı umut verici DNA aşı adaylarından olan ve T. gondii takizoitlerinden izole edilen SAG1 geni klonlanmıştır. (Turkiye Parazitol Derg 2015; 39: 255-9) Anahtar Kelimeler: Toxoplasma gondii, Toxoplasmosis, SAG1 Geni, DNA Aşısı, Klonlama Geliş Tarihi: 26.07.2014Kabul Tarihi: 13.08.2015ABSTRACT Objective: Toxoplasma gondii, which is observed in our country and worldwide, can cause mortality and is an important public health problem because of engaging babies from pregnant women. An effective vaccine against toxoplasmosis has not yet been developed. SAG1 protein is released from the bradyzoites and tachyzoites stages of T. gondii and is important at the pathogenesis of the disease. This study aimed to clone a promising DNA vaccine candidate, SAG1 gene, of T. gondii. Methods: T. gondii genomic DNA was isolated from tachyzoites of T. gondii. SAG1 gene was amplified with specific primers and then cloned into the pJET1.2 vector. Recombinant plasmids were transformed into Escherichia coli cells. The presence of recombinant plasmids was determined by polymerase chain reaction (PCR) screening. Following the purification of the recombinant plasmid from positive colonies, cloning was confirmed by PCR, restriction enzyme assays, and DNA sequence analysis. Results: After PCR with SAG1 gene-specific primers, 1010-bp PCR products were obtained. Recombinant plasmid, which was transformed into competent E. coli cells, was verified by PCR screening. Moreover, PCR verified that the recombinant plasmids contained the SAG1 gene. The DNA sequence was analyzed, and the DNA sequence was obtained. Conclusion: One of the promising DNA vaccine candidates against toxoplasmosis, SAG1...