Rate of abnormalities in lambs from in vitro produced embryos transferred on Day 2 compared with Day 6 postfertilization

Produção in vitro de embriões ovinos

“…Apesar de ter sido demonstrada a possibilidade de evitar o bloqueio in vitro, cultivando embriões ovinos fecundados in vivo, em meio simples e com redução da tensão de oxigênio, já no inicio da década de 70 [68], somente após quase duas décadas, esse efeito benéfico foi novamente comprovado [27,71,78]. Desta forma, o cultivo na ausência de células somáticas e sob tensão reduzida de oxigênio foi também empregado para os embriões fecundados in vitro sendo, hoje, o sistema preferencial de cultivo [57,79]. O meio de cultivo mais utilizado tem sido o SOF, acrescido de aminoácidos essenciais e não essenciais, BSA ou soro (Tabela 1).…”

“…O estádio dos embriões tem influência na taxa de sobrevivência dos embriões produzidos in vitro, mas não na daqueles produzidos in vivo [35]. Embriões cultivados por dois dias [79] resultaram em menor porcentual de nascimentos (24%; 38/156) que aqueles cultivados por seis dias (57%; 45/79), provavelmente pela maior seleção, que já ocorre in vitro, naqueles cultivados por mais tempo. Em termos de blastocistos, os menos avançados apresen- i t l u c e d a m e t s i S o v i t l u c e d s a i D ) T / N ( s o t n e m i c s a n % a i c n ê r e f e R o t u d i v o .…”

“…Algumas anormalidades na gestação ou no nascimento têm sido associadas com a manipulação in vitro de embriões ovinos [75]. Trabalho de parto pouco intenso e aumento na duração da gestação, no peso dos cordeiros ao nascer e na mortalidade perinatal foram observados após o cultivo in vitro de embriões fecundados in vivo [76], ou quando os embriões passaram por todas as etapas de produção in vitro [34,35,58,70,79,83].…”

“…De fato, pelo menos por um curto período após fecundação, nos 3 sistemas de cultivo avaliados por Holm et al [35], os zigotos foram expostos a altas concentrações de soro humano, o que poderia explicar a ocorrência de anormalidades, independentemente do sistema de cultivo empregado posteriormente. No entanto, o nascimento de cordeiros com peso excessivo ou anomalias congênitas, a partir de embriões com 2 ou 6 dias de cultivo, na ausência de soro [79], sugere que o soro não seria o único fator envolvido. É provável que todas as etapas da produção in vitro [83] e mesmo a manipulação dos embriões para a transferência (possíveis mudanças de temperatura ou pH) possam contribuir para esse fenômeno.…”

Formación de pronúcleos mediante la inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) seleccionados por unión a la zona pelúcida en ovocitos de ovino activados químicamente

“…La FIV se ha realizado con semen fresco (Shirazi et al, 2008), descongelado (Grazul-Bilska et al, 2006) o usando espermatozoides sexados, seleccionando aquellos con cromosoma "X" o "Y" (Hollinshead et al, 2004;Morton et al, 2004). Los cigotos obtenidos después de la FIV generalmente se cultivan in vitro de 2 a 6 días (Walmsley et al, 2004), para posteriormente realizar la TE que se define como la colocación de embriones en fase preimplantacional a nivel del oviducto o del cuerno uterino en hembras seleccionadas donde se desarrollará el feto hasta el nacimiento o se criopreservan los embriones para una posterior TE (Dattena et al, 2000;Papadopoulos et al, 2002;Morton et al, 2004).…”