Purification and expression of a processing protease on β‐alanine‐oxoglutarate aminotransferase from rat liver mitochondria

Abstract

GABA[arrow beta]AlaAT convertase is an endopeptidase that processes brain-type 4-aminobutyrate aminotransferase (GABA AT; EC 2.6.1.19) to liver-type b-alanine-oxoglutarate aminotransferase (b-AlaAT I) in rats. Its molecular mass was 180 kDa as determined by gel filtration. A subunit molecular mass of 97 652 Da was measured using MALDI-TOF MS. The N-terminal sequence of the purified GABA[arrow beta]AlaAT convertase was SRVEVSKVLILGSGGLSIGQAGEFDYSGS-QAV-and was identical to residues 418-449 of carbamoylphosphate synthetase I (CPS I; EC 1.2.1.27) purified from rat liver. The subunit molecular mass and the N-terminal amino acid sequence suggested that GABA[arrow beta]AlaAT convertase was the 418-1305 peptide of CPS I. An expression vector containing the coding region of the 418-1305 peptide of rat CPS I was transfected into NIH3T3 cells and the extract of the cells showed GABA[arrow beta]AlaAT convertase activity.

Partucularities of g-aminobutyric acid metabolism in the liver of rats during different types of alcohol withdrawal

“…В гепатоцитах были обнаружены полный набор ферментов обмена ГАМК, аналогичный головному мозгу, однако печеночные формы ферментов катаболизма ГАМК являются более неспецифическими [21][22][23]. Так, ГАМК-Т печени способна к переаминированию не только ГАМК, но и b-аланина и пищевых w-аминокислот, а её функции отличаются от функций фермента, локализованного в нервной ткани, поскольку ГАМК не является в печени нейромедиатором [21,22]. Позже было показано, что первично в печени происходит синтез ГАМК-Т, по строению аналогичной ферменту мозгового типа.…”

“…Позже было показано, что первично в печени происходит синтез ГАМК-Т, по строению аналогичной ферменту мозгового типа. Затем этот фермент-предшественник подвергается частичному протеолизу посредством эндопептидазы и превращается в b-аланин-оксоглутарат-аминотрансферазу [22]. ЯПА-дегидрогеназа в печени также является неспецифичным ферментом и окисляет, помимо янтарного, другие полуальдегиды [23,24].…”

“…Параллельное повышение концентраций b-аланина, глутамата и глутамина при низкой активности катаболизма ГАМК может свидетельствовать об общем угнетении обмена этой аминокислоты в печени. Известно, что b-аланин и глутамат являются субстратами неспецифичной ГАМК-Т печени, а глутамин -основным предшественником глутамата в печени и головном мозге [22,25]. Помимо глутамина и глумата, за пределами нервной системы источниками ГАМК являются путресцин, спермин, спермидин и орнитин [9].…”