Production and assay of cellulolytic enzyme activity of Enterobacter cloacae WPL 214 isolated from bovine rumen fluid waste of Surabaya abbatoir, Indonesia

Abstract

Aim:This study aims to produce and assay cellulolytic enzyme activity (endo-(1,4)-β-D-glucanase, exo-(1,4)-β-D-glucanase, and β-glucosidase, at optimum temperature and optimum pH) of Enterobacter cloacae WPL 214 isolated from bovine rumen fluid waste of Surabaya Abbatoir, Indonesia.Materials and Methods:To produce enzyme from a single colony of E. cloacae WPL 214, 98 × 1010 CFU/ml of isolates was put into 20 ml of liquid medium and incubated in a shaker incubator for 16 h at 35°C in accordance with growth time and optimum temperature of E. cloacae WPL 214. Further on, culture was centrifuged at 6000 rpm at 4°C for 15 min. Pellet was discarded while supernatant containing cellulose enzyme activity was withdrawn to assay endo-(1,4)-β-D-glucanase, exo-(1,4)-β-D-glucanase, and β-glucosidase.Results:Cellulase enzyme of E. cloacae WPL 214 isolates had endoglucanase activity of 0.09 U/ml, exoglucanase of 0.13 U/ml, and cellobiase of 0.10 U/ml at optimum temperature 35°C and optimum pH 5.Conclusion:E. cloacae WPL 214 isolated from bovine rumen fluid waste produced cellulose enzyme with activity as cellulolytic enzyme of endo-(1,4)-β-D-glucanase, exo-(1,4)-β-D-glucanase and β-glucosidase.

Isolation and identification of cellulolytic bacteria from gastrointestinal tract of Arabian horse and investigation of their effect on the nutritional value of wheat straw

“…cloacae whose CMCase activity was 2Á69 U ml À1 . Lokapirnasari et al (2015) isolated Ent. cloacae WPL 214 from bovine rumen fluid waste that produced cellulase enzyme, indicating that Ent.…”

Sekuensing 16S DNA Bakteri Selulolitik Asal Limbah Cairan Rumen Sapi Peranakan Ongole (SEQUENCING OF 16S DNA OF CELLULOLYTIC BACTERIA FROM BOVINE RUMEN FLUID WASTE ONGOLE CROSSBREED)

“…Bakteri tersebut telah dilaporkan berperan dalam degradasi lignoselulosa (Ramin et al, 2008;Ramin et al, 2009). Berdasarkan laporan penelitian sebelumnya, telah diketahui bahwa isolat selulolitik E. cloacae WPL 214 memiliki kemampuan menghasilkan tiga macam enzim selulase yaitu, endo-â-1,4-glucanase sebesar 0,09 unit/mL (U/mL), exo-â-1,4-glucanase sebesar 0,13 U/mL, dan â-glucosidase sebesar 0,10 U/ mL (Lokapirnasari et al, 2015). Namun, isolat selulolitik tersebut belum diidentifikasi secara molekuler, sehingga perlu dilakukan uji lebih lanjut melalui isolasi DNA serta amplifikasi gen penyandi 16S DNA dengan PCR untuk mengidentifikasi lebih lanjut isolat selulolitik tersebut secara molekuler, sehingga dapat ditemukan isolat selulolitik yang baru.…”

“…Isolasi DNA bakteri selulolitik dilakukan dengan menggunakan metode Ausubel et al (2003). Bahan isolat yang digunakan diperoleh dari hasil penelitian sebelumnya yaitu E. cloacae WPL 214 (Lokapirnasari et al, 2015). Suspensi sel sebesar 100 mL yang sudah ditumbuhkan, dipanen dengan sentrifugasi 10 menit, 6000 rpm, 4°C.…”

Pemberdayaan Masyarakat Melalui Aplikasi Teknologi Inseminasi Buatan, Pengolahan Pakan , Biofarmaka Dan Limbah Dalam Upaya Pengembangan Sentra Kambing Di Kecamatan Kerek Dan Merakurak Kabupaten Tuban

“…Peningkatan kualitas pakan tersebut diperoleh dari hasil fermentasi menggunakan probiotik yang mikrobanya memiliki kemampuan selulolitik dan proteolitik. Enzim selulase yang dihasilkan oleh bakteri selulolitik tersebut mampu mendegradasi selulosa menjadi molekul yang lebih sederhana (Lokapirnasari, 2013;Lokapirnasari et al, 2015). Untuk memastikan efek pada peningkatan berat badan ternak dilakukan pemberian pakan complete feed selama satu bulan.…”