Problemas na padronização da reação em cadeia da polimerase para diagnóstico da tuberculose pulmonar

Abstract

OBJETIVO: Padronizar reação em cadeia da polimerase para diagnóstico de tuberculose pulmonar, comparando os resultados obtidos com as técnicas microbiológicas clássicas, e analisar seu uso numa região de alta prevalência da tuberculose. MÉTODOS: Foram descontaminadas, após a baciloscopia, 42 amostras de escarro de pacientes. Em seguida, procedeu-se ao cultivo em Lowenstein-Jensen e à reação em cadeia da polimerase com "primers" que amplificam um fragmento de 123 pares de base do genoma do Mycobacterium tuberculosis. RESULTADOS: Das 42 amostras de escarro, 10 apresentaram cultura positiva para M. tuberculosis. Dez foram positivas à baciloscopia e 16 mostraram-se positivas na reação em cadeia da polimerase. A sensibilidade e especificidade do teste em relação à cultura foi de 90% e 81%, respectivamente. CONCLUSÕES: A reação em cadeia da polimerase tem sensibilidade comparável à da cultura e pode ser realizada em apenas um dia, resultando em tratamento precoce e melhor controle da doença. A padronização e avaliação de técnicas de biologia molecular no diagnóstico da tuberculose no Brasil é imprescindível na discussão da implantação deste exame na rotina diagnóstica em centros de referência.

"Avaliação crítica do uso da reação em cadeia da polimerase e exames complementares no diagnóstico da tuberculose cutânea e micobacteriose atípica"

“…A tuberculose causa a morte de mais de 3 milhões de pessoas por ano no mundo e é considerada a segunda causa de mortalidade por doença infecciosa sendo a SIDA a primeira (Kox, 1995;Bollela et al, 1999). A cada ano, surgem oito milhões de novos casos, com prevalência global de 160 casos por 100.000…”

“…A tuberculose é mais freqüente em países com maior incidência de infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) (Chaisson, Nachega, 2003 A tuberculose cutânea também ressurgiu com o aparecimento da SIDA, com o recrudescimento da tuberculose pulmonar e a resistência a multidroga terapia (Fenniche et al, 2003;Barbagallo et al, 2003). Assim, o indivíduo infectado pela M.tuberculosis e pelo vírus do HIV tem risco 6 a 100 vezes maior de adoecer de tuberculose do que aquele que é infectado apenas com o M. tuberculosis (Bollela et al, 1999). A Organização Mundial de Saúde (OMS) considera a tuberculose uma emergência global, e incentiva medidas de controle da doença em todo o mundo.…”

“…A Organização Mundial de Saúde (OMS) considera a tuberculose uma emergência global, e incentiva medidas de controle da doença em todo o mundo. Observa-se que sem mudança nas condições sócio-econômicas da população, o controle da tuberculose depende apenas do diagnóstico precoce e do tratamento efetivo, além de vacinação e quimioprofilaxia dos contactantes (Bollela et al, 1999).…”

“…Nesta situação, a coloração específica para bacilos álcool-ácido-resistentes (BAAR), métodos de imunohistoquímica e teste tuberculínico são exames importantes para o diagnóstico diferencial. Com freqüência observa-se em formas paucibacilares da doença, que a pesquisa de BAAR, a imunohistoquímica e as culturas são negativas (Hsu et al, 1981;Wiley et al, 1991;Taippeiner, Wolf, 1993;Kox, 1995;Kutzner et al, 1998;Bollela et al, 1999;Ulukanligil et al, 2000;Ferreira et al, 2002).…”

“…A cultura é considerada padrão-ouro para o diagnóstico da tuberculose, porém é um método demorado (cerca de 4 a 8 semanas) (Bollela et al, 1999;Senturk et al, 2002). Atualmente, o desenvolvimento de técnicas de biologia molecular permite a amplificação de seqüência de ácido desoxirribonucleico (DNA)-alvo, veio contribuir, significativamente, para a diagnose desses casos mais difíceis, além da vantagem de ser um método de alta sensibilidade, especificidade e rápida execução (Cook et al, 1994;Telenti et al, 1993;Kox, 1995;Richter et al, 1995;Degitz, 1996;Roth et al, 1997;Chuang et al, 1997;Tan et al, 1999;Quiros et al, 2000;Tan et al, 2001;Ena et al, 2001;Ogusku et al, 2002;Senturk et al, 2002;Hsiao et al, 2003;Honore-Boukaline et al, 2003).…”