Potency of partially purified malleo-proteins for mallein test in the diagnosis of glanders in equines

Verma, R.D.; Venkateswaran, K.; Sharma, Jitendra Kumar; Agarwal, G. S.

doi:10.1016/0378-1135(94)90035-3

Cited by 11 publications

(23 citation statements)

References 4 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Responsável por alta taxa de mortalidade em eqüídeos, a doença ocorre em diferentes partes do mundo, tendo sido descrita no Iraque (Al-Ani et al 1987), no Egito e em certas partes da África (Henning 1956), na Itália (Battelli et al 1973, na Índia (Gangulee et al1966;Verma et al 1994) Based on clinical-pathological, epidemiological and serological aspects, as well as by the isolation of Burkholderia mallei, foci of glanders were diagnosed in equids of the "Zona da Mata" in the states of Pernambuco and Alagoas. Clinically there was hyperthermia, noisy respiration, loss of appetite, progressive loss of weight leading to emaciation, nasal congestion and muco-purulent discharge, erosions, ulcers and scars of the nasal mucosa.…”

Section: Introdução Introdução Introdução Introdução Introduçãomentioning

confidence: 99%

Mormo em eqüídeos nos Estados de Pernambuco e Alagoas

et al. 2000

View full text Add to dashboard Cite

Com base em aspectos clínico-patológicos, epidemiológicos e sorológicos, bem como pelo isolamento de Burkholderia mallei, diagnosticaram-se focos de mormo em eqüídeos na Zona da Mata dos Estados de Pernambuco e Alagoas. Clinicamente observaram-se hipertermia, respiração ruidosa, inapetência, emagrecimento progressivo até caquexia, congestão nasal e descarga mucopurulenta, erosões, úlceras e cicatrizes na mucosa nasal. Os linfonodos mandibulares e cervicais superficiais apresentavam-se aumentados de volume, com abscessos e fístulas exsudando material purulento. Na pele, ao longo dos vasos linfáticos, havia formação de nódulos firmes e abscessos que, nos casos crônicos, fistulavam e ulceravam deixando cicatrizes estrelares. A histopatologia dos nódulos de diversos sítios, tanto dos eqüídeos como dos cobaios utilizados na prova de Straus, revelou lesões granulomatosas e piogranulomas. Os dados deste estudo evidenciam a emergência da doença nesta área e permitem recomendar inquéritos soro-epidemiológicos nos Estados de ocorrência dos surtos e nos Estados limítrofes.

show abstract

Section: Introdução Introdução Introdução Introdução Introduçãomentioning

confidence: 99%

Mormo em eqüídeos nos Estados de Pernambuco e Alagoas

et al. 2000

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Obteve-se a maleína por meio da precipitação e purificação ácida, utilizando-se ácido tricloroacético e sulfato de amônia A maleína concentrada foi centrifugada e o sobrenadante diluído em igual quantidade de solução tampão de glicose. A PPD-maleína de concentração conhecida foi então colocada em ampolas esterilizadas e resfriadas (Verma et al 1994, OIE 2008.…”

Section: Methodsunclassified

“…Esses animais também foram inoculados com 0,1ml de cada PPD-maleína por via intradérmica, utilizando-se o mesmo procedimento empregado no G1. Os animais foram identificados pela sigla "C" (cobaio) seguida pelo número do animal e o lado da inoculação "E ou D" (esquerdo e direito), para posterior avaliação da reação alérgico-cutânea (Verma et al, 1994). Todos os procedimentos de avaliação da PPD--maleína quanto à esterilidade, segurança, potência, concentração do conservante seguiram as recomendações da OIE (2008).…”

Section: Methodsunclassified

“…De acordo com Verma et al (1994) e Neubauer et al (2005, a maleinização utilizando a PPD-maleína é a téc-nica de maior especificidade quando comparado a outras técnicas de diagnóstico do mormo. Entretanto o maior entrave para a utilização da maleinização em alta escala é a dificuldade na aquisição e o valor do imunógeno importado, limitando o seu uso na elucidação dos casos suspeitos e positivos.…”

Section: Introductionunclassified

See 1 more Smart Citation

Produção e purificação parcial de PPD-maleína para diagnóstico do mormo em equídeos

Silva

Campos-Takaki

Teles³

et al. 2014

Pesq. Vet. Bras.

View full text Add to dashboard Cite

Pesq. Vet. Bras. 34(1):57-61, janeiro 2014 57 RESUMO.-Objetivou-se com este estudo produzir e purificar parcialmente a PPD-maleína a partir de amostras de Burkholderia mallei isoladas de equídeos no Brasil com potencial para uso no diagnóstico do mormo. As linhagens de B. mallei fenotipicamente caracterizadas e de virulência comprovada foram inoculadas em caldo Dorset-Henley para crescer e metabolizar. Em seguida, as proteínas foram separadas por precipitação com ácido tricloroacético e precipitadas com sulfato de amônia. As PPDs-maleínas foram concentradas em 1,0mg/ mL e na avaliação realizada em cobaios foi eficaz no desenvolvimento da hipersensibilidade do tipo tardia e consequentemente na identificação de animais verdadeiro positivos e exclusão dos verdadeiro negativos, sendo uma possibilidade em potencial para utilização no diagnóstico do mormo. INTRODUÇÃOO mormo é considerado a principal doença bacteriana dos equídeos, sendo transmissível ao homem e a outras espé-cies animais. Registrada sua reemergência no Brasil (Mota et al. 2000), atualmente a doença constitui um sério problema sanitário para os equídeos das regiões Norte e Nordeste do País (Mota et al. 2005, Brasil 2008 The objective of this study was to produce and partially purify Malleo-protein from Burkholderia mallei samples isolates from Equidae in Brazil with potential for use in the diagnosis of glanders. The strain B. mallei phenotypically characterized and proven virulent was inoculated into broth Dorset-Henley to grow and metabolize. The proteins were separated by trichloroacetic acid precipitation and amonium sulfate precipitation. The PPD mallein was concentrated 1.0mg/mL and biologically tested in guinea pigs. It was effective in the development of delayed-type hypersensitivity and consequently to identify true--positive animals and to exclude of true negatives. There is the possibility for potential use in the glanders diagnosis in Equidae.

show abstract

“…A PPD--maleína de concentração 1,69mg/mL (dosado no Qubit ® Fluorometer Invitrogen) foi então colocada em ampolas esterilizadas, rotuladas e refrigeradas (Verma et al 1994, OIE 2008b.…”

Section: Methodsunclassified

Desenvolvimento e avaliação de um teste ELISA indireto para o diagnóstico sorológico do mormo em equídeos

et al. 2012

View full text Add to dashboard Cite

Glanders is an infectious-contagious disease of acute or chronic character which principally affects horses, causing enormous losses in the productive chain of this animal. To control the disease, the Ministry of Agriculture, Husbandry and Supply instituted mandatory sanitation measures in the entire national territory which include an ofϐicial diagnosis through the complement ϐixation (CF) test, maleinization and sacriϐice of the animals that are positive. Nowadays the kits used for the diagnosis of the disease are imported, making their routine application difϐicult and more expensive. The objective of this study was to standardize an indirect ELISA test, using the proteic extract of Burkholderia mallei isolated from a carrier horse in the state of Pernambuco. The samples were cultivated in 10% blood agar and incubated for 48h at 37°C; later, one of the isolated colonies was characterized phenotypically and genotypically and immediately cultivated in brain heart infusion (BHI) for enrichment; then it was peaked (repicada) for the Dor-set Henley medium which was incubated at 37ºC under 60rpm for eight weeks. To standardize the test the Protein G Peroxidase Sigma Conjugate was used in the dilution of 1:90.000, with serums diluted in 1:100 and the antigen in 1:400. Sixty serums were used as negative controls, tested before the CF to determine the cutting point which was 0.042nm. After establishing the standardization, 300 samples were tested, of which 99% (297) were in agreement with the results obtained in the CF. At the end, of assay presented 100% sensibility and 98.2% speciϐicity, with predictive (preditivo) positive and negative values of 97.7% and 100% respectively. The Kappa concordance test was 0.98 and the intra and interplac repeatability were 8.8% and 10.3% respectively. From the results obtained, it is possible to afϐirm that the indirect ELISA test can be used as an efϐicient diagnosis tool. However, more essays must be carried out to consolidate the reliability of this test.

show abstract

Potency of partially purified malleo-proteins for mallein test in the diagnosis of glanders in equines

Cited by 11 publications

References 4 publications

Mormo em eqüídeos nos Estados de Pernambuco e Alagoas

Mormo em eqüídeos nos Estados de Pernambuco e Alagoas

Produção e purificação parcial de PPD-maleína para diagnóstico do mormo em equídeos

Desenvolvimento e avaliação de um teste ELISA indireto para o diagnóstico sorológico do mormo em equídeos

Contact Info

Product

Resources

About