Polymer functionalized submicrometric emulsions as potential synthetic DNA vectors

Trimaille, Thomas; Chaix, Carole; Pichot, Christian; Delair, Thierry

doi:10.1016/s0021-9797(02)00069-3

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“…Validação da metodologia para quantificação do pdT 16 Os parâmetros de validação selecionados para doseamento do pdT 16 por UV seguiram as normas de validação dos procedimentos analíticos e de metodologias do "International Conference on the Harmonization of Technical Requirements for the Registration of Pharmaceuticals for Human Use" 20 . Foram avaliados os parâmetros de linearidade, repetibilidade, precisão intermediária e especificidade.…”

Section: Preparação Das Nanoemulsõesunclassified

“…O método mostrou-se linear (r² =0,9974) em uma gama de concentração de 2,5 a 25 µg/mL e preciso (DPR = 2,05 e 1,70%, para repetibilidade e precisão intermediária, respectivamente). A especificidade foi testada na presença de glicerol (fase externa das nanoemulsões), demonstrando que esse adjuvante não influencia na quantificação do pdT 16 . 16 Em uma primeira etapa, a recuperação do pdT 16 foi determinada em unidades de ultrafiltração constituídas de celulose regenerada de 30 kDa (Ultrafree ® , Millipore ® ).…”

Section: Preparação Das Nanoemulsõesunclassified

“…A especificidade foi testada na presença de glicerol (fase externa das nanoemulsões), demonstrando que esse adjuvante não influencia na quantificação do pdT 16 . 16 Em uma primeira etapa, a recuperação do pdT 16 foi determinada em unidades de ultrafiltração constituídas de celulose regenerada de 30 kDa (Ultrafree ® , Millipore ® ). Soluções aquosas contendo pdT 16 (25 a 250 µg/mL) foram centrifugadas e a quantidade de pdT 16 no ultrafiltrado foi determinada.…”

Section: Preparação Das Nanoemulsõesunclassified

“…Estudos posteriores de potencial zeta, transferência de energia de fluorescência e de tensão interfacial permitiram caracterizar a interação dos oligonucleotídeos com os constituintes das formulações (fosfolipídeos e/ou lipídeos catiônicos), sugerindo a adsorção dos ON na interface óleo/água (O/A) das nanoemulsões 12,13 . Recentemente, foi descrita na literatura 15,16 a viabilidade de preparação de nanoemulsões catiônicas contendo ON, através do procedimento de emulsificação espontânea. O interesse desse procedimento reside, entre outros, na sua adequação para preparação de pequenos lotes de formulação, a temperaturas moderadas, em estudos de bancada e na possibilidade de funcionalização da interface das nanoemulsões, através da nanodeposição de polímeros pré-formados 15,17 .…”

Section: Introductionunclassified

“…Após essa etapa de otimização, a isoterma de adsorção de um oligonucleotídeo politimidilato (pdT 16 ) foi realizada, bem como a avaliação da influência da adsorção do ON sobre a morfologia e as propriedades físico-químicas das nanoemulsões (i.e., diâmetro, potencial zeta e viscosidade).…”

Section: Introductionunclassified

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Adsorção de oligonucleotídeos em nanoemulsões obtidas por emulsificação espontânea

Martini¹,

Carvalho²,

Teixeira³

et al. 2007

Quím. Nova

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Recebido em 21/7/06; aceito em 12/9/06; publicado na web em 27/4/07 OLIGONUCLEOTIDE ADSORPTION ON NANOEMULSIONS OBTAINED BY SPONTANEOUS EMULSIFICATION. This paper describes the adsorption of an oligothymidylate (pdT 16 ) on nanoemulsions obtained by spontaneous emulsification procedures. Formulations were composed by medium chain triglycerides, egg lecithin, glycerol, water (NE) and stearylamine (NE SA ). After optimization of operating conditions, the mean droplet size was smaller than 255 nm. Adsorption isotherms showed a higher amount of pdT 16 adsorbed on cationic NE SA (60 mg/g) compared to NE (20 mg/g). pdT 16 adsorption was also evidenced by the inversion of the ζ-potential of NE SA (from +50 to -30 mV) and the morphology of oil droplets examined through transmission electron microscopy. The overall results showed the role of electrostatic interactions on the adsorption of pdT 16 on the oil/water interface of nanoemulsions.Keywords: cationic nanoemulsions; oligonucleotides; adsorption. INTRODUÇÃOA complexação de polinucleotídeos em sistemas coloidais lipídicos catiônicos (i.e., lipossomas, nanopartículas e nanoemulsões) tem sido considerada como uma estratégia promissora para sua administração in vivo [1][2][3][4] . Nos últimos anos, a formação de complexos entre polinucleotídeos e nanoemulsões catiônicas tem sido particularmente descrita na literatura [5][6][7][8][9][10][11][12][13][14] . Nanoemulsões catiônicas são geralmente constituí-das de um núcleo oleoso (de origem natural ou semi-sintética) estabilizado por mistura binária de fosfolipídeos e lipídeos catiônicos. Os polinucleotídeos formam espontaneamente um complexo em meio aquoso através de interações eletrostáticas entre os grupamentos fosfato e os grupamentos carregados positivamente dos lipídeos catiônicos. A carga de superfície positiva dessas nanoestruturas conduz a um aumento significativo da penetração intracelular dos polinucleotídeos, em decorrência das interações com as membranas celulares carregadas negativamente 8,10,14 . Além disso, a formação do complexo reduz a cinética de degradação dos polinucleotídeos frente ao ataque enzimático 6,7,11,12 . Estudos relativos à formação de complexos entre polinucleotídeos em fita simples, denominados oligonucleotídeos (ON), e nanoemulsões catiônicas obtidas por microfluidização foram descritos por Teixeira e colaboradores [11][12][13][14] . A carga de superfície e o tamanho do fragmento foram identificados como os principais fatores que influenciam a eficiência de complexação do ON com a nanoestrutura 11 . Estudos posteriores de potencial zeta, transferência de energia de fluorescência e de tensão interfacial permitiram caracterizar a interação dos oligonucleotídeos com os constituintes das formulações (fosfolipídeos e/ou lipídeos catiônicos), sugerindo a adsorção dos ON na interface óleo/água (O/A) das nanoemulsões 12,13 . Recentemente, foi descrita na literatura 15,16 a viabilidade de preparação de nanoemulsões catiônicas contendo ON, através do procedimento de emulsificação espontânea. O inter...

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Section: Preparação Das Nanoemulsõesunclassified

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Adsorção de oligonucleotídeos em nanoemulsões obtidas por emulsificação espontânea

Martini¹,

Carvalho²,

Teixeira³

et al. 2007

Quím. Nova

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Redox Properties of Ferricyanide Ion on Layer‐by‐Layer Thin Film‐Coated Gold Electrodes; Effects of Type of Polycationic Components in the Film

et al. 2006

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The surface of a gold (Au) electrode was coated with layer-by-layer (LbL) thin films composed of poly(vinyl sulfate) (PVS) and different type of poly(amine)s including poly(allylamine) (PAH), poly(ethyleneimine) (PEI) and poly(diallyldimethylammonium chloride) (PDDA) and redox properties of ferricyanide ion ([Fe(CN) 3À ion can be confined in the film and the redox potential is polycation-dependent.

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Carbon Nanotubes as a DNA Delivery Agent for Generation of Genetically Modified Mammals Embryos

Brandão¹,

Munk

Carvalho³

et al. 2015

Bioengineering Applications of Carbon Nanostructures

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Adsorção de oligonucleotídeos em nanoemulsões obtidas por emulsificação espontânea

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