Physio-Chemical Characteristics of Seminal Plasma and Development of Media and Methods for the Cryopreservation of European eel Sperm

Asturiano, Juan F.; Pérez, Luz; Garzón, D.L.; Marco‐Jiménez, Francisco; Peñaranda, David S.; Vicente, J.S.; Jover, M.

doi:10.1007/s10695-005-1553-x

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“…Aunque se han ensayado diversas dosis e intervalos de tratamiento (Boetiüs y Boetiüs, 1967), un tratamiento sencillo que se ha aplicado con éxito en diversas ocasiones es el uso de inyecciones semanales de 1,5 UI/g pez, el cual permite, después de 5-6 semanas obtener esperma de las anguilas por masaje abdominal (Amin, 1997;Pérez et al 2000;Asturiano et al 2004aAsturiano et al y 2004b.…”

Section: Maduración Gonadal En Anguilasunclassified

“…Se han desarrollado métodos de inducción hormonal que logran la producción de volúmenes importantes de esperma de buena calidad (Pérez et al 2000;Asturiano et al 2004a;Asturiano et al 2004b;Müller et al 2004). Este hecho ha motivado el interés por desarrollar técnicas para la conservación y manejo apropiado del esperma de esta especie.…”

Section: Maduración Gonadal En Anguilasunclassified

“…El resultado de la criopreservación depende de la calidad del semen extraído (estructura y crio-resistencia de los espermatozoides), así como de la composición físico-química del plasma seminal ya que el plasma presenta una alta variabilidad entre especies e individuos Pérez et al 2000;Asturiano et al 2001Asturiano et al y 2004a). …”

Section: Producción Del Esperma De Anguilaunclassified

“…Para ello se utilizaron dos medios de congelación descritos previamente para anguila japonesa, el TNK ) y el K30 junto con dos medios isosmóticos P1 y P2 (Asturiano et al 2004a). Estos medios (P1 y P2) fueron preparados considerando los resultados de pH y composición iónica del plasma seminal de las muestras de esperma con mejor calidad obtenida en el experimento anterior.…”

Section: Discusión Generalunclassified

“…Se utilizaron dos diluyentes: TNK descrito para anguila japonesa por y P1, propuesto por Asturiano et al (2004a) para anguila europea y utilizando DMSO como crioprotector. Para determinar el efecto del pH en los medios el esperma fue diluído 1:20 en P1 o TNK y a cada medio se le ajustó el pH: 7.0, 7.5, 8.0 y 8.5 para P1 y 7.8 y 8.5 para el medio TNK, los resultados que fueron comparados con los pools control después de 5 min de incubación.…”

Section: Discusión Generalunclassified

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Inducción hormonal de la espermiación y criopreservación de esperma en anguila europea (Anguilla anguilla).

Cortés¹,

Ladislao²

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4 RESUMEN La producción de anguilas se basa en la captura de angulas, pero la captura de éstas no se ha podido incrementar al mismo ritmo que su demanda para el engorde en piscifactorías. La caída de las capturas de angulas llevó a la búsqueda por todo el mundo de nuevos suministros, planteándose la reproducción en cautividad como una de las alternativas de mayor importancia.Debido a que las anguilas no maduran sexualmente en cautividad se han desarrollado métodos de inducción hormonal que logran la producción de volúmenes importantes de esperma de buena calidad (Pérez et al. 2000;Müller et al. 2004). Este hecho ha motivado el interés por desarrollar técnicas para la recolección y manejo apropiado del esperma de esta especie. En este sentido se decidió realizar una serie de experimentos con la finalidad de desarrollar técnicas de congelación y estudios sobre la calidad del esperma de anguila europea.El primero de ellos trató de optimizar los tratamientos de inducción hormonal en machos de anguila europea (procedentes de piscifactoría) para obtención de esperma.Fueron probados cinco tratamientos hormonales (A-E) con gonadotropina coriónica humana (hCG) para inducir la maduración gonadal y la espermiación en machos de anguilas procedentes de piscifactoría. Se vio que una dosis semanal de 1.5 UI hCG/g pez, es la que permite obtener un mayor porcentaje de machos espermiantes, un periodo de espermiación más largo y un mayor volumen de esperma.A continuación se estudiaron protocolos de criopreservación utilizando como base medios diluyentes descritos para anguila japonesa (K15, K30, TNK) y dos descritos anteriormente para anguila europea (P1 y P2). A los espermatozoides congelados en estos medios se les realizaron análisis de movilidad (pre y postcongelación): la velocidad angular (VAP), velocidad curvilínea (VCL), velocidad de línea directa (VSL) y frecuencia de batido del flagelo (BCF). Estos parámetros se analizaron con un programa informático para análisis de esperma (CASA). Los espermatozoides congelados en los medios de congelación TNK y P1, conteniendo dimetilsulfóxido (DMSO) y lecitina, mostraron los mayores resultados de supervivencia postcongelación. 5Una vez definido el diluyente de mejores características se procedió a probar una batería de crioprotectores (DMSO, acetamida, etilenglicol, propanol, glicerol y metanol) con la finalidad de definir el mejor para anguila europea. Al mismo tiempo se estudió el efecto de la adición de suero fetal bovino (FBS) a los medios de congelación, y del factor de dilución esperma:medio de congelación. El efecto de estos factores se evaluó mediante la comparación pre y post-congelación del porcentaje de células móviles, porcentaje de células vivas y de su morfometría. Cada mezcla contenía 75 µl de crioprotector, 425 µl medio P1 y 250 µl de esperma en una relación de 1:2 (v/v).El mejor resultado global se logró con DMSO mezclado en P1 modificado, conteniendo FBS como diluyente, dando como resultado un incremento significativo del porcentaje de movilidad espermática post-c...

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