Phospholipase A2 Inhibitors from Snake Blood (sbPLIs)

Fortes-Dias, Consuelo Latorre; Campos-Júnior, Paulo Henrique Almeida; Fernandes, Carlos A. H.; Fontes, M.R.M.

doi:10.1007/978-94-007-6410-1_33

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“…This work shows for the first time the structural and functional characterization of the Boaγ-PLI, a PLI from Boa constrictor, a non-venomous Brazilian snake. Contrasting with the number of PLIs isolated from venomous snakes [14,16], only a small number of this molecule were isolated from non-venomous snakes [19,22], suggesting that the PLI is not restricted to protection against self-envenomation, but it may be involved in other unknown physiological mechanisms that has yet to be determined [23].…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 91%

BoaγPLI: Structural and functional characterization of the gamma phospholipase A2 plasma inhibitor from the non-venomous Brazilian snake Boa constrictor

et al. 2020

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Plasma in several organisms has components that promote resistance to envenomation by inhibiting specific proteins from snake venoms, such as phospholipases A 2 (PLA 2 s). The major hypothesis for inhibitor's presence would be the protection against self-envenomation in venomous snakes, but the occurrence of inhibitors in non-venomous snakes and other animals has opened new perspectives for this molecule. Thus, this study showed for the first time the structural and functional characterization of the PLA 2 inhibitor from the Boa constrictor serum (BoaγPLI), a non-venomous snake that dwells extensively the Brazilian territory. Therefore, the inhibitor was isolated from B. constrictor serum, with 0.63% of recovery. SDS-PAGE showed a band at~25 kDa under reducing conditions and~20 kDa under non-reducing conditions. Chromatographic analyses showed the presence of oligomers formed by BoaγPLI. Primary structure of BoaγPLI suggested an estimated molecular mass of 22 kDa. When BoaγPLI was incubated with Asp-49 and Lys-49 PLA 2 there was no severe change in its dichroism spectrum, suggesting a non-covalent interaction. The enzymatic assay showed a dose-dependent inhibition, up to 48.2%, when BoaγPLI was incubated with Asp-49 PLA 2 , since Lys-49 PLA 2 has a lack of enzymatic activity. The edematogenic and myotoxic effects of PLA 2 s were also inhibited by BoaγPLI. In summary, the present work provides new insights into inhibitors from non-venomous snakes, which possess PLIs in their plasma, although the contact with venom is unlikely. OPEN ACCESS Citation: Rodrigues CFB, Serino-Silva C, Morais-Zani Kd, Kavazoi VK, Carvalho MPN, Grego KF, et al. (2020) BoaγPLI: Structural and functional characterization of the gamma phospholipase A2 plasma inhibitor from the non-venomous Brazilian snake Boa constrictor. PLoS ONE 15(2): e0229657. https://doi.org/10.

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Section: Resultsmentioning

confidence: 91%

BoaγPLI: Structural and functional characterization of the gamma phospholipase A2 plasma inhibitor from the non-venomous Brazilian snake Boa constrictor

et al. 2020

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“…Diversas moléculas possuem capacidade inibitória sobre as PLA2s, incluindo inibidores químicos (SOARES et al, 2000), moléculas encontradas em plantas, animais e fungos, como flavonoides, alcaloides e outras proteínas (SOARES et al, 2005;MARCUSSI et al, 2007;TOYAMA et al, 2010;COTRIM et al, 2011), bem como as que são encontradas em plasma de serpentes (DUNN;BROADY, 2001;SAMY et al, 2012;CAMPOS et al, 2016;FORTES-DIAS et al, 2016;SERINO-SILVA et al, 2018).…”

Section: Fosfolipases A2s (Pla2s)unclassified

“…Em razão da semelhança estrutural e de catálise entre as PLA2s de venenos e as humanas, os PLIs também são considerados com grande potencial para o descobrimento de novos agentes terapêuticos relacionados com as desordens inflamatórias e com a elucidação da relação estrutura-função entre PLA2s e PLIs, sendo a interação do PLI com a proteína-alvo essencial para o entendimento do papel dessa molécula, tanto com relação à função fisiológica, como ao seu potencial biotecnológico (FORTES-DIAS et al, 2016). Outras ações também foram descritas pelos PLIs, como por exemplo a ação anti-tumoral, anti-angiogênica e antimetastática (GIMENES et al, 2017).…”

Section: Inibidores Em Plasma De Serpentes (Plis)unclassified

“…Já foi demonstrado que a pré-incubação de PLI com o antiveneno policlonal pode potencializar a eficácia contra os efeitos locais como a miotoxicidade do veneno (LIZANO; DOMONT;PERALES, 2003). Porém, o uso comercial desses inibidores ainda é questionado pela quantidade necessária, bem como aspectos ecológicos da purificação desses inibidores do soro de serpentes (FORTES-DIAS et al, 2016). A produção de forma recombinante vem sendo explorada (OKUMURA et al, 1999;LE et al, 2015;GIMENES et al, 2020), bem como a investigação in sílico de peptídeos derivados de PLIs com ação inibitória contra PLA2s também são alvos de investigação (SOBRINHO et al, 2019).…”

Section: Inibidores Em Plasma De Serpentes (Plis)unclassified

“…Em razão de suas diferenças estruturais, tais inibidores podem ser classificados em três grupos de acordo com sua conformação: PLIα, PLIβ e PLIγ (FORTES-DIAS et al, 2016), cujos domínios estão relacionados com a interação entre o inibidor e a PLA2 (FORTES-DIAS et al, 2016). Diferentes tipos de PLIs, mais especificamente PLIα e PLIγ, podem ocorrer simultaneamente na mesma serpente.…”

Section: Inibidores Em Plasma De Serpentes (Plis)unclassified

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Identificação, isolamento e caracterização do inibidor de PLA2 presente no soro da serpente não peçonhenta >i<Boa constrictor >/i<

Rodrigues¹

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O pensamento parece uma coisa à toa; mas como é que a gente voa quando começa a pensar..." Lupicínio Rodrigues, Felicidade"Não acredito em dom E tudo é tão transitório Só fazer comprova existir" Boogarins "Jogue as ideias no ar" Boogarins, A Tradição. AGRADECIMENTOSAgradecer é um ato sublime, é a compreensão de nossa jornada e das pessoas que, sem as quais, tal jornada não seria possível. Sempre costumo brincar que "jogo minha vida no hard", que sempre meus caminhos são tortuosos e coisas inimagináveis acontecem. Mas, na verdade, o que mais tenho é sortee gratidãoexatamente por, durante minhas andanças, encontrar pessoas tão incríveis em meu cotidiano.Primeiramente, agradeço à minha família incrível (Mãe, Tio Lucas, Pai, Ana, Vó, Vô), que sempre me apoiou e acreditou em mim quando nem eu mesma acreditava, que me acolhe e luta por mim em todos os âmbitos. Aos meus irmãos Ana Luísa e Lucas, que me fazem querer ser exemplo e que sempre me dão tanto orgulho.Ao meu companheiro Bruno, meu consultor de estatística particular, que está do meu lado mesmo quando estamos bem longe, que compreende a ciência e minhas escolhas, que é a melhor pessoa do mundo inteiroe que encanta a todos que conhece.Aos meus amigos, que mesmo em contextos tão distintos sempre estiveram do meu lado, me incentivando e me fazendo ter a certeza de acolhimento. Por serem quem são e estarei aqui, cada um de sua forma.Ao meu antigo orientador, Marcos Hikari Toyama, por me ensinar do zero os caminhos da ciência, por me lapidar, por me incentivar e ser um colaborador para todo momento mesmo que eu tenha seguido outros caminhos, pelo carinho e cuidado que o senhor tem mesmo a distância. É muito gratificante dizer que a orientação se transformou em amizade. À minha orientadora, Anita Mitico Tanaka-Azevedo, por me acolher, por aceitar a orientação no escuro e acreditar em mim e em meu potencial. Por me fazer crescer, por me fazer cientista, conhecer novos mundos, novas técnicas. Pela postura de mãe que transforma o laboratório em família. Agradeço imensamente por tudo o que você me fez e proporcionou, e tenho certeza de que se sou uma pessoa (e cientista) melhor hoje, você é grande responsável.À Karen de Morais Zani, pessoa que admiro e me inspiro, a quem recorri muitas vezes para auxílio. Saiba que você é uma pesquisadora incrível, de extrema organização e critérios, de um coração gigante. Sou muito grata pelas conversas, pelo cotidiano, pelas ideias e conselhos.À Kathleen Fernandes Grego, diretora do Laboratório de Herpetologia do Instituto Butantan, a qual possui uma postura admirável, impecável. É lindo ver seu trabalho e a maestria com que dirige o laboratório. Agradeço imensamente pela gentileza, e por ter permitido que essa tese se desenvolvesse. Obrigada pela retirada de sangue da Boa constrictor.A todos os funcionários do Laboratório de Herpetologia do Instituto Butantan, por serem fundamentais para que os trabalhos se desenvolvam de forma eficaz. Pelo amor aos animais e a maestria no cuidado. Ao Marcelo Pires Nogueira de Carvalho pela disponibili...

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Chemistry Between Salamanders: Evolution of the SPF Courtship Pheromone System in Salamandridae

Bossuyt

Maex

Treer

et al. 2019

Chemical Signals in Vertebrates 14

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Phospholipase A2 Inhibitors from Snake Blood (sbPLIs)

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BoaγPLI: Structural and functional characterization of the gamma phospholipase A2 plasma inhibitor from the non-venomous Brazilian snake Boa constrictor

Identificação, isolamento e caracterização do inibidor de PLA2 presente no soro da serpente não peçonhenta >i<Boa constrictor >/i<

Chemistry Between Salamanders: Evolution of the SPF Courtship Pheromone System in Salamandridae

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