Performance of Various Testing Methodologies for Detection of Heteroresistant Vancomycin-Intermediate Staphylococcus aureus in Bloodstream Isolates

Abstract

The best screening method for detecting heteroresistant vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus (hVISA) remains unclear. Using population analysis profiling utilizing the area under the concentration-time curve (PAP-AUC) as the gold standard, we screened 458 consecutive methicillin-resistant S. aureus (MRSA) bloodstream isolates to determine the most accurate and cost-effective testing strategy to detect the presence of heteroresistance. All isolates were also tested using the macromethod Etest (MET) and glycopeptide resistance detection (GRD) Etest. The MIC was determined by several methods, including standard vancomycin Etest, vancomycin broth microdilution (BMD), and Vitek2 testing. Fifty-five (12%) hVISA and 4 (1%) VISA isolates were detected by PAP-AUC. Compared to PAP-AUC, the sensitivities and specificities of MET, GRD Etest, BMD (using a MIC cutoff of >2 mg/liter), and standard vancomycin Etest (using a MIC cutoff of >2 mg/liter) were 89 and 55%, 71 and 94%, 82 and 97%, and 71 and 94%, respectively. Combination testing increased the overall testing accuracy by reducing the number of false-positive results. Cost was determined predominately by the number of PAP-AUC runs required following a screening assay. The most cost-effective strategy was BMD (using a MIC cutoff of >2 g/ml) as a standalone assay or in combination with PAP-AUC, provided that BMD testing was batched. GRD Etest remained an alternative, with 71% of hVISA isolates detected. Prevalence influenced both cost and test accuracy, with results remaining unchanged for hVISA prevalences of up to 25%. Implementation of any testing strategy would therefore be dependent on balancing cost with accuracy in a given population and clinical context.

Rapid Detection of Vancomycin-Intermediate Staphylococcus aureus by Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization–Time of Flight Mass Spectrometry

“…Thus, an assay that can reliably detect these isolates in the clinical microbiology laboratory is of considerable interest. While a number of screening methods for hVISA have been published (e.g., BHI agar supplemented with 3 g/ml vancomycin), these typically require prolonged incubation (48 h) (41,42). We have shown that our assay can detect between two-thirds and three-quarters of the PAP-AUC-confirmed hVISA …”

Metisiline Dirençli Staphylococcus aureus İzolatlarının Antibiyotik Direnci ve Azalmış Vankomisin Duyarlılığının Araştırılması: Çok Merkezli Bir Çalışma

“…Bu suşları saptamak için bir dizi tarama deneyi geliştirilmiş, ancak uygun ve güvenilir olan standart bir yaklaşım saptanamamıştır. Bu suşların saptanmasında kolay, hızlı ve ucuz olması nedeniyle rutin laboratuvarlarda 3-4-6 mg/L vankomisin içeren BHI tarama yöntemi kullanıl-maktadır 18,19 .…”

Investigation of Reduced Vancomycin Susceptibility in Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Strains

“…Her bir suşa ait üremenin olmadı-ğı en düşük konsantrasyon minimal inhibitör konsantrasyon (MİK) olarak değerlendirildi. Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI) kriterlerine (9) göre vankomisin MİK değeri okundu. S. aureus için ≤2 μg/ml olanlar duyarlı, 4-8 μg/ml olanlar orta derecede duyarlı, ≥16 μg/ml olanlar da dirençli kabul edildi (9) .…”

“…Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI) kriterlerine (9) göre vankomisin MİK değeri okundu. S. aureus için ≤2 μg/ml olanlar duyarlı, 4-8 μg/ml olanlar orta derecede duyarlı, ≥16 μg/ml olanlar da dirençli kabul edildi (9) . Kontrol suşu olarak S. aureus ATCC 29213 kullanıldı.…”

“…Vankomisin içeren beyin kalp infüzyon agar (BHIA), gradient test, makroyöntem gradient test ve PAP AUC (population analysis profile area under the curve, popülasyon analiz profili eğri altında kalan alan) gibi çeşitli tarama yöntemleri VISA/hVISA suş-larının saptanması amacıyla sıklıkla kullanıl-maktadır. VISA/hVISA suşlarının tanımlanma-sında popülasyon analiz profili (PAP AUC) altın standart yöntemdir (5)(6)(7)(8)(9) . …”