Introducción: el Ministerio de Educación Nacional (MEN) de Colombia reconoció 420 instituciones de educación superior (IES), de las cuales 243 (57.8%) ofrecen programas técnicos o tecnológicos. El procesamiento de tejidos debe tener fundamento teórico y entrenamiento práctico para la preparación de tejidos humanos, animales o vegetales como apoyo diagnóstico. Esta profesión no es muy conocida y juega un papel relevante en el diagnóstico de patologías. Objetivo: determinar el conocimiento que tiene el personal de salud que labora en un hospital de cuarto nivel de atención con respecto a las habilidades y capacidades del citohistólogo. Métodos: estudio de corte transversal que incluyó trabajadores de una institución prestadora de servicios (IPS) de salud. Se calculó el tamaño muestral de 231 en Epi-info 7. Este trabajo fue aprobado por el comité de ética en investigación. Resultados: 231 trabajadores de la salud fueron interrogados, con una mediana de edad de 25 años (RIQ: 22-31), 83,1% mujeres, 61,5% conocen la definición correcta de citohistología y 49,3% lo relacionan con un aporte en promoción y prevención de cáncer. Conclusiones: existe un desconocimiento por parte de los trabajadores de la IPS sobre las actividades del citohistólogo y sus funciones, como la adecuada fijación, traslado y procesamiento de los tejidos, que al no realizarse en forma correcta afectan el diagnóstico patológico, lo cual incide en la morbilidad por muestras inadecuadas, causando además trastornos administrativos hospitalarios.