Penggunaan Enrichment-Selective Medium Untuk Meningkatkan Sensitifitas Pemeriksaan Laboratorium Difteri

Abstract

Konfirmasi laboratorium kasus difteri dilakukan dengan isolasi dan tes toksigenisitas bakteri penyebab difteri menggunakan metode konvensional berbasis kultur. Metode konvensional memiliki keterbatasan dalam hal sensitivitas pemeriksaan. Penelitian ini bertujuan untuk menguji penggunaan darah domba + telurit sebagai enrichment-selective medium untuk meningkatkan sensitivitas pemeriksaan laboratorium difteri dengan metode konvensional. Sebanyak 18 spesimen klinis (swab tenggorok) penderita difteri digunakan sebagai sampel penelitian. Swab tenggorok tersebut sebelumnya telah digunakan untuk pemeriksaan Polymerase Chain Reaction (PCR) sehingga proses ekstraksi DNA menyebabkan jumlah sel bakteri yang tertinggal menjadi sangat terbatas. Sel bakteri tersebut ditumbuhkan menggunakan 2 cara yang berbeda, yaitu inokulasi langsung dan inokulasi yang didahului dengan penggunaan enrichment-selective medium. Hasil identifikasi bakteri penyebab difteri dibandingkan antara keduanya. Hasil penelitian menunjukkan bahwa inokulasi secara langsung hanya berhasil mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri penyebab difteri (Corynebacterium diphtheriae) pada 3 dari 18 sampel yang diperiksa. Sebaliknya dengan penggunaan enrichment-selective medium, bakteri penyebab difteri berhasil diisolasi dan diidentifikasi pada 9 dari 18 sampel yang diperiksa. Oleh karena itu, disimpulkan bahwa enrichment-selective medium (darah domba + telurit) dapat digunakan untuk meningkatkan sensitivitas pemeriksaan laboratorium difteri.
 Laboratory confirmation for diphtheria cases are performed by using conventional culture-based method for isolation/identification and toxigenicity of the bacteria causing diphtheria. This method has limitation in its sensitivity. This study aimed to examine the sensitivity of sheep blood + tellurite as the enrichment selective medium to improve the sensitivity of the conventional method. The samples were 18 clinical specimens (throat swabs) obtained from diphtheria patient, which had been used for Polymerase Chain Reaction (PCR) assay, therefore the DNA extraction process caused the number of bacteria cells to be very limited. The samples were cultured by two different methods, directly on the agar medium and indirectly through enrichment selective medium previously. The result showed that the directly inoculation could isolate C. diphtheriae as many as 3 out of 18 samples, whereas indirectly method by using enrichment selective medium could isolate and identify 9 out of 18 samples. In conclusion, enrichment selective medium (sheep blood + tellurite) may improve the examination sensitivity of bacteria causing diphtheria identification in the laboratory.

Toxigenic Diphtheriae Profile in Children in 2017-2018

“…Other possible pavement reported was myocarditis and polyneuropathy. 2,21 Myocarditis usually happens by the second week after onset, while polyneuropathy is in the third. Polyneuropathy influences either the motoric or sensory nervous system.…”

“…Mortality is primarily induced by heart and/or respiratory failure. 2 Transmission occurs via droplet with an incubation time of 2-7 days after getting infected. Humans, as the host, could show clinical manifestations or be carriers.…”

Hubungan Status Imunisasi DPT terhadap Kasus Difteri di Kota Surabaya

“…Positivy rate yang rendah salah satunya disebabkan oleh penegakan diagnosis klinis yang kurang tepat. 14 Peningkatan sensitivitas uji klinis kasus difteri dapat ditingkatkan dengan menggunakan metode PCR. Namun, penggunaan PCR belum menjadi metode yang diterima untuk menentukan konfirmasi laboratorium kasus difteri.…”

“…Enrichment-selective medium adalah media pengayaan yang dilengkapi dengan agen selektif yang dimaksudkan untuk menghambat pertumbuhan bakteri non-target, mendukung pertumbuhan dan meningkatkan jumlah bakteri target dalam sampel. 14 Pemeriksaan laboratorium untuk kasus difteri sangat penting dilakukan untuk memastikan kasus serta mendeteksi kemungkinan penularan kepada kontak erat atau penularan penyakit yang disebabkan kontak erat. Hasil uji klinis dengan menggunakan metode konvensional berbasis kultur sangat bergantung pada keberhasilan me-recovery bakteri target yang ada dalam sampel klinis.…”

“…Dengan menggunakan tellurite, tidak hanya dapat menekan pertumbuhan bakteri non-target, tetapi juga dapat dengan mudah menekan pertumbuhan bakteri target dalam media kultur, sehingga dapat menjadi masalah apabila sampel yang diambil memiliki jumlah sel bakteri target yang sedikit, walaupun bakteri penyebab difteri secara alami memiliki faktor resistensi terhadap telurit. 14 Laporan studi menyatakan bahwa status imunisasi lengkap pasien difteri di Kota Surabaya tahun 2018 sebesar 51,2%, sedangkan status imunisasi lengkap dan tidak lengkap pada pasien difteri di Kota Surabaya sebesar 48,8%. Riset yang dilakukan Arini melaporkan cakupan imunisasi tidak lengkap pada pasien difteri di Kota Surabaya pada tahun 2017 sebanyak 81,5% dan status imunisasi lengkap sebanyak 18,5%.…”