Papel do IP3 na transdução de sinal e função da heme oxigenase em Plasmodium falciparum.

Abstract

Aos meus pais e a cada professor que deparei em meu percurso. AGRADECIMENTOSÀ minha querida orientadora, Professora Dra. Célia Regina da Silva Garcia por ter aberto as portas de seu laboratório nos meus passos iniciais na ciência, pelas oportunidades dadas e ajuda nas horas difíceis, pela orientação e discussões tanto no período de iniciação científica quanto no doutorado. À Dra. Paula Barttlet e Professor Dr. Andrew P. Thomas pela colaboração no início do meu doutorado, pela paciência e ajuda na microscopia, pelas dicas e apoio. A todos os membros do laboratório na UMDNJ que me fizeram sentir em casa durante meu estágio no exterior.Aos colegas de laboratório com os quais tive o privilégio de conviver durante meu percurso. Todos sempre solícitos e abertos a discussões: Dr. Alexandre Budu, Dra. Mirian Moraes, Ms. Desiree Schuck, Dra Fernanda Koyama, Lucas Borges, Dra. Laura Cruz, Dr. Plasmodium falciparum, agente etiológico da malária, possui um ciclo de vida que envolve dois hospedeiros (fêmea do mosquito Anopheles e humanos) onde apresenta refinadas estratégias que envolvem mudanças morfológicas e bioquímicas em diferentes ambientes para garantir a sua sobrevivência. O estudo da maquinaria de sinalização deste parasita tem revelado a geração de segundos mensageiros e proteínas efetoras da sinalização celular importantes na percepção de estímulos extracelulares no parasita. Esta tese tem como finalidade demonstrar que o P. falciparum dentro do eritrócito é capaz de usar a via de sinalização celular dependente do segundo mensageiro inositol trifosfato (IP 3 ). Para isto usamos um IP 3 permeável a membrana celular denominado (caged-IP 3 ) que é liberado para atuar como segundo mensageiro na presença de luz ultravioleta. Investigamos os estoques de Ca 2+ intracelular sensíveis ao IP 3 neste parasita e exploramos a sensibilidade ao IP 3 em diferentes estágios no ciclo intraeritrocítico. Demonstramos que o hormônio melatonina, importante na manuntenção da sincronicidade da fase intraeritrocítica de P. falciparum, é capaz de aumentar a concentração de IP 3 neste parasita. Com o uso de uma coluna de afinidade ao IP 3 tentamos encontrar proteínas candidatas ao receptor de IP 3 em P. falciparum. Este trabalho também estuda a enzima heme oxigenade de P. falciparum (PfHO). Testamos a capacidade desta enzima em converter biliverdina (BV) em bilirubina (BR), uma importante reação do catabolismo da hemina. Estudamos a modulação desta atividade na presença de diversas metaloprotoporfirinas e o potencial destes compostos como antimaláricos. Reportamos que a biliverdina é capaz de modular o ciclo intraeritrocítico de P. falciparum e apresentamos a proteína enolase de P. falciparum como candidato ao sensor de BV neste parasita. Plasmodium falciparum, the etiological agent of malaria, possesses a life cycle that involves two hosts (the female of Anopheles mosquito and human) on which has refined strategies involving morphological and biochemical changes in different environments to ensure its survival. The study of the signaling m...