Papain Induces Apoptosis by Regulating Caspase-3 and Caspase-9 Genes in HepG2 Cells

Abstract

Hepatosellüler karsinom (HCC), kansere bağlı ölüm sıralamasında ikinci sırada yer alır ve dünya genelinde sıklığı artmaktadır. Papain proteolitik bir enzimdir ve potansiyel antikanser ajanıdır. Çalışmanın amacı, papainin insan hepatom HepG2 hücre hattındaki sitotoksik etkisinin apoptoz üzerinden değerlendirilmesidir. Papainin sitotoksisitesi MTT yöntemi ile belirlendi. Papain uygulanan HepG2 hücrelerinin morfolojik değişiklikleri, akridin portakalı ve etidyum bromür (AO/EB) ikili boyaması ile değerlendirildi. Apoptotik aktivite qPCR yöntemi ile apoptoz düzenleyici kaspaz-3 ve kaspaz-9 genlerinin anlatımları ile tespit edildi. HepG2 hücrelerine 48 saat boyunca 500 µg/ml, 250 µg/ml, 100 µg/ml, 50 µg/ml, 25 µg/ml ve 10 µg/ml papain uygulaması sonucunda IC50 değeri 53 µg/ml bulundu. Apoptotik belirteçler olan kaspaz 3 ve 9 gen ifadeleri, HepG2 hücrelerinde papain uygulaması sonucunda önemli ölçüde arttı. Sonuç olarak, papain HCC tedavisi için, apoptoz düzenleyici genlerin anlatımını indükleyerek antikanser etkiye sahip olabilir.