P. Aeruginosa Bakterisinin Vitamin B Kompleksi ve Kırmızı Lazer Kullanılarak İnaktive Edilmesi

Abstract

Son yıllarda anti-bakteriyel direnç olgusu, bakterilerin neden olduğu hastalıklarla mücadelede daha fazla sorun haline gelmiştir. Biz bu çalışmayla, açık yara ve yanıkların fırsatçı patojeni olan Pseudomonas aeruginosayı daha etkili bir yöntemle inaktive etmeyi ve fotodinamik inaktivasyon(PDI) gelişimine katkıda bulunmayı hedefledik. Pseudomonas aeruginosa bakterisini, vitamin B kompleksi ve lazer ile inaktive olduğunu spektrofotometrik ölçümler ve antimikrobiyal madde etkinliği analiz yöntemleriyle gösterdik. Ayrıca PDI'nin bakteri üremesi üzerindeki etkisi hem kalitatif hem de kantitatif olarak değerlendirilmiştir. Escherichia coli ve Pseudomonas aeruginosa suşları karşılaştırılarak ölüm oranları belirlendi. Koloni oluşturma birimi oranlarında Escherichia coli bakteri suşlarının karanlık ve ışık deneyinde vitamin B kompleksinin 0,25 mg/mL ve 0,125 mg/mL konsantrasyonlarında % 20’lik bir ölüm oranı görülmüştür. Pseudomonas aeruginosa bakteri suşlarının karanlık deneyinde vitamin B kompleksinin 0,5 mg/mL ve 0,125 mg/mL konsantrasyonlarında çok az bir ölüm oranı görülürken lazer maruziyet sonrası ölüm oranları sırasıyla % 60 ve % 50 çıktığı görülmüştür. Bu ölüm oranlarını doğrulama amaçlı akış sitometresi canlılık deneyleri yapılmış ve çıkan sonuçlar birbiriyle paralellik göstermiştir. Bu çalışmadan elde edilen veriler ışığında; kırmızı lazer diyotun, vitamin B kompleksi ile birlikte Pseudomonas aeruginosa bakterisinin inaktivasyonu için uygun bir aday olduğunu öngörmekteyiz. Yaptığımız bu çalışma, bakteriyel enfeksiyonların tedavisi için hastane, tıp ve mikrobiyoloji alanlarında yapılacak alternatif tedavi yöntemlerine ışık tutacaktır.

Vitamin B Kompleksinin Fotodinamik Terapiyle Kolon Kanserine Etkisi

“…Lazer çıkışı uygulama alanına 5 mW'lık ışık güçü aktarmaktadır. Dozlama süresince (5 dakikada) net 7,5 J/cm 2 miktarında ışık akısı ilgili örnek yüzeyine aktarılmaktadır [19][20][21].…”

“…Hücreler yukarıda anlatıldığı şekilde çoğaltılıp, sayıldıktan sonra 10 3 hücre/kuyu olacak şekilde 100 µl besiyeri/kuyu içeren 96 kuyucuklu plaklara ekildi ve 24 saat 37 o C (% 5 CO2)'de kuyulara tutunmaları için inkübasyona bırakıldı. Ertesi gün lipozomlu vitamin B kompleks hazırlanan ana stoklardan 0; 0,0625; 0,125; 0,25; 0,5; 1 mg/mL olacak şekilde hücrelere uygulandı [20,21]. Bu maddelerin hücre canlılığına olan etkileri incelenmek üzere, ilaç+ışık uygulamasından 24 saatin sonunda MTT (3-4,5-dimetil-tiyazolil-2,5-difeniltetrazolyum bromür, (5 mg/mL, SIGMA)'den 10 µl eklendi.…”