Optimization of the binding of dissociated exfoliated cervico-vaginal cells to glass microscope slides.

Abstract

In order to monitor the development of a cell dissociation technique, it was essential to utilize the Centrifugal Cytology rotor to produce glutaraldehyde-fixed even cellular dispersions. The Cytology rotor has been improved to insure rapid alignment with the centrifugal field during both acceleration and deceleration, and the fixative is now delivered to the surface of the slide. The dissociation of the cells results in a loss of their adhesion to glass slides. Three bonding agents were tested: (a) Poly-L-Lysine; (b) Mayer's albumin fixative; (c) positively charging the slides with a silicone coating. The results with 65% albumin-coated slides were clearly superior to the other two. The addition of a postfixation step of 95% ethanol/4% polyethylene glycol did not significantly affect the recovery of the cells, but did eliminate some unevenness in the Centrifugal Cytology preparations, flattened the cells and expedited the procedure.

Flow cytometry of keratinocytes

“…Disaggregation of isolated epidermis or epithelium is based on further treatment with trypsin or dithio-threitol (DTT) (Hentzer & Kobayasi 1976, Bauer & deGrood 1976, D7T or EDTA (La Mont etal. 1974, Leif et al 1977), ultrasonication (Parry et al 1971, Garcia & Tolles 1977 or ultrasonication and DTT (Moller & Larsen 1979). The method described by Laerum (1969) separates basal cells from differentiating cells in both normal and hyperplastie mouse epidermis (Laerum 1972, Clausen 1979 (Fig.…”

Utilização da albumina na citologia esfoliativa em pacientes com conjuntivite alérgica

“…Utilizamos a albumina em lâminas com o objetivo de avaliá-la como fixador de material do raspado conjuntival. A albumina é empregada principalmente nos esfregaços de citologia esfoliativa de colo uterino, para uma melhor aderência do material colhido à lâmina (1)(2)(5)(6) . Apesar da citologia das célu-las epiteliais íntegras mostrar uma maior quantidade de células nas lâminas com albumina, isto se deu apenas na fase de pré-tratamento e tratamento B, já com os neutrófilos ocorreu o inverso, a quantidade dessas células foi maior em lâminas não albuminadas, somente no tratamento B. Nossos resultados revelaram que não houve importante favorecimento na utilização das lâminas com albumina em relação às sem albumina para a maioria das células pesquisadas.…”

“…Os esfregaços podem aderir melhor às lâminas passandose previamente sobre as mesmas cola de gelatina ou albumina (2) . Esse procedimento é utilizado de rotina na anatomia patológica, sendo também utilizado em esfregaços de células do colo uterino (5)(6) . A albumina utilizada nesses esfregaços é conhecida como albumina de Mayer e é obtida pela mistura de uma parte de glicerina pura com uma parte de clara de ovos de galinhas (7) .…”

Capillary electrophoresis using immobilized whole cells with overexpressed endothelin receptor for specific ligand screening

“…30 000 molecular weight, 0.5 mg/mL in water) for 5 min, and incubated for 30 min [24,25]. The column was then charged again with poly-L-lysine for 5 min and incubated for 2 h. The column was then dried by airflow for 2 h, the fixed cells in the PBS buffer were purged into the poly-Llysine-coated column.…”