Optimization of Thawing Regimen for Cryopreserved Human Sperm at Normoand Pathospermia

Abstract

Реферат: Внаслідок поширеного розвитку допоміжних репродуктивних технологій актуальним є вдосконалення способів кріоконсервування сперміїв. У роботі досліджено показники морфофункціонального стану кріоконсервованих сперміїв людини в нормі та при патології за різних способів відтавання. Усі зразки витримували над дзеркалом рідкого азоту, подальший нагрів сперміїв здійснювали на водяній бані (37, 50, 60, 70°С) та витримували за кімнатної температури до появи рідкої фази. Морфофункціональний стан сперміїв оцінювали за їхньою рухливістю та життєздатністю, а стан хроматину -за допомогою акридину оранжевого. Встановлено, що режим відтавання при 50°С (із попередньою інкубацією зразків у парах рідкого азоту (-150°С)) після кріоконсервування сперміїв за 3-етапною програмою ефективно зберігає їх рухливість без змін цілісності мембрани та стану нуклеарного хроматину в нормі та при астенозооспермії. Відтавання зразків при кімнатній температурі за тих же умов є найбільш травматичним для сперміїв у випадку як нормо-, так і астенозооспермії.Ключові слова: спермії людини, кріоконсервування, відтавання, рухливість, деконденсація, хроматин.Реферат: Вследствие широкого развития вспомогательных репродуктивных технологий актуальным является совер-шенствование способов криоконсервирования спермиев. В работе исследованы показатели морфофункционального состоя-ния криоконсервированных спермиев человека в норме и с патологией при различных способах оттаивания. Все образцы выдерживали над зеркалом жидкого азота, дальнейший нагрев спермиев осуществляли на водяной бане (37, 50, 60, 70°С) и выдерживали в условиях комнатной температуры до появления жидкой фазы. Морфофункциональное состояние сперма-тозоидов оценивали, подсчитывая подвижность и жизнеспособность, а состояние хроматина клеток -с помощью акридина оранжевого. Установлено, что режим оттаивания спермиев при 50°С (с предварительной инкубацией образцов в парах жидкого азота (-150°С)) после криоконсервирования по 3-этапной программе эффективно сохраняет их подвижность без изменений целостности мембраны и состояния нуклеарного хроматина при нормо-и астенозооспермии. Оттаивание образцов при комнатной температуре в тех же условиях является наиболее травматичным для спермиев человека в слу-чае как нормо-, так и астенозооспермии.Ключевые слова: спермии человека, криоконсервирование, оттаивание, подвижность, деконденсация, хроматин.Abstract: Due to the widespread development of assisted reproductive technologies an actual task is to improve current methods of sperm cryopreservation. We studied the morphological and functional states of the cryopreserved human sperm in normal and pathological conditions at different regimens of thawing. All samples were maintained above the mirror of liquid nitrogen with further heating of spermatozoa in a water bath (37, 50, 60, 70°C) or maintaining at room temperature until the liquid phase appearance. Morpho-functional state of sperm was estimated by their motility and viability. Assessment of sperm chromatin was carried out using acridine orange staining. ...

In vitro application of Ceratonia siliqua improved sperm parameters and chromatin quality after vitrifacation in normozoospermic aged men

“…In order to improve sperm cryopreservation outcome, many factors such as the composition of freezing medium, the method of sample packaging and freezing/ thawing duration have been evaluated [12][13][14]. Freezing and thawing media supplementation with antioxidants agents are an effective way of overcoming the challenges of sperm vitrification [15].…”

Modeling of chronic prostatitis. Abacterial prostatitis in the aspects of reproduction of experimental hypofertility (review)

“…У 50 % пар із незапланованованою бездітністю аномальні параметри сперми вказують на етіологічну роль у цій проблемі чоловічого фактору [6]. Збільшення відсот ку останнього пов'язана з погіршенням якості сперматозоїдів, у тому числі, зі зниженням запліднювальної здатності [7][8][9][10], що може бути наслідком порушень не тільки у самих гонадах (гаметах), а й в інших органах репродуктивної системи, зокрема, передміхуровій залозі (ПЗ), що як само по собі, так і у сукупності може знижувати плідність чоловіків. Внаслідок хронічного запалення ПЗ нерідко змінюється обмін статевих гормонів, що веде до андрогенно-естрогенного дисбалансу, до відхилень в утворенні та транспорті, погіршення якісних і кількісних показників спермивиникають порушення відтворювальної функції [11,12].…”