Optimization of cultivation parameters for bovine respiratory syncytial virus strain Vologda/2019

Abstract

Оптимизация параметров культивирования вируса респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота штамма «Вологда/2019» РЕЗЮМЕ В настоящее время в изучении респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота есть множество спорных вопросов. В связи с этим актуальным является изучение биологических свойств вируса, оптимизация методов его культивирования и подбор наиболее технологичных приемов конструирования средств диагностики и профилактики данного заболевания. Целью настоящей работы являлись выбор чувствительных клеточных систем и оптимизация параметров культивирования в подобранных культурах клеток. В опытах использовали штамм «Вологда/2019» вируса респираторносинцитиальной инфекции крупного рогатого скота, выделенный из биологического материала, полученного от теленка с признаками респираторной патологии. Штамм адаптирован к перевиваемой культуре клеток слизистой носовых перегородок крупного рогатого скота (BT) и депонирован в Государственную коллекцию штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ». Установлено, что перевиваемые линии клеток трахеи эмбриона крупного рогатого скота (FBT) и почки теленка (RBT) являются наиболее чувствительными клеточными системами для репродукции респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота штамма «Вологда/2019», в данных культурах клеток отмечалось максимальное накопление вируса. Цитопатическая активность вируса в культуре клеток FBT на 4-5 сут культивирования составила от 4,78 ± 0,18 до 5,50 ± 0,16 lg ТЦД 50 /см 3 , а в клеточной системе RBT -от 4,00 ± 0,23 до 4,75 ± 0,20 lg ТЦД 50 /см 3 . Определено, что при множественности заражения культур клеток FBT и RBT вирусом в 0,1 lg ТЦД 50 /кл, использовании в составе поддерживающей питательной среды 2% глютамина, а также 2% сыворотки крови лошади либо крупного рогатого скота удается получить вирусный материал с высокой цитопатической активностью.Ключевые слова: респираторно-синцитиальный вирус крупного рогатого скота, штамм «Вологда/2019», культивирование, цитопатическая активность, титр вируса.Благодарность: Работа выполнена за счет средств ФГБУ «ВНИИЗЖ» в рамках тематики научно-исследовательских работ «Ветеринарное благополучие».