Oocyte nuclear maturation at the time of oocyte aspiration is independent of in vitro fertilization potential in the domestic cat

Abstract

This study determined (1) the temporal kinetics of nuclear maturation at and after follicular oocyte aspiration and (2) the significance of variations in nuclear maturation and sperm-oocyte co-incubation interval on in vitro fertilization (IVF) in the domestic cat. Female cats were treated with pregnant mares' serum gonadotropin followed 84 h later with human chorionic gonadotropin (hCG). Twenty-five hours after hCG, ovarian follicular oocytes were aspirated laparoscopically and classified according to morphological criteria. Oocytes classified as mature were cultured for 0, 2, 4, 6, or 8 h in Ham's F10 medium and then stained for nuclear maturation. The proportion of oocytes at metaphase II was similar (P > 0.05) at 0 (38.2%) and 2 (48.5%) h of culture, but was higher (P < 0.05) at 4 (76.5%), 6 (82.8%), and 8 (92.3%) h. Oocytes also were collected and cultured as described above and then co-incubated for 2 or 18 h with 5 x 10(5) motile cat sperm cells/ml. The incidence of IVF (cleavage to 2-cells by 30 h post-insemination) was consistently 2-fold higher (P > 0.05) for the 18 h compared to the 2 h gamete co-incubation groups. However, despite differences in nuclear maturation at the time of oocyte recovery, IVF success was unaffected (P > 0.05) by pre-insemination culture interval (0 h, 72.7%; 2 h, 73.3%; 4 h, 70.7%; 6 h, 57.8%; 8 h, 62.5%; 18 h group). Thus, the majority of oocytes recovered from cats treated with this gonadotropin regimen has not achieved metaphase II by follicular aspiration.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)

Progestin Exposure Before Gonadotropin Stimulation Improves Embryo Development after In Vitro Fertilization in the Domestic Cat1

“…Spindler et al [35] determined that oocytes with high rates of glucose metabolism were more likely to develop to advanced stages of embryonic development. In the present study, all treatments produced oocytes with carbohydrate metabolism and nuclear maturation rates similar to those seen previously in high-quality oocytes from cats [38,40,41,66]. Consistent with these high metabolism rates in aspirated oocytes, there also was no difference in oocyte fertilization rates or the proportion of oocytes reaching advanced stages of embryonic development following IVF.…”

MATURAÇÃO in vitro DE OVÓCITOS DE GATA DOMÉSTICA (Felis catus)

“…Remoção das células do cúmulus: Após 24 horas de incubação, os COCs foram colocados em placa de Petri de 35 mm de diâmetro contendo meio HMEM com hialuronidase (0,4%; fórmula magistral), incubados a 37ºC por 5 minutos (BYERS et al, 1994) e pipetados repetidas vezes para remover as células do cúmulus aderidas à zona pelúcida. Foram, a seguir, lavados em HMEM sem hialuronidase para remover os debris das células do cúmulus.…”

Análise citogenética de oócitos de jaguatirica (Leopardus pardalis) e gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) coletados após estimulação ovariana

“…Alguns oócitos classificados como grau I e II apresentaram cromossomos condensados em seu interior, perfazendo um total de 12% (n=4) em jaguatirica e 36% (n=4) em gato-do-mato-pequeno, porém não foi possível a caracterização dos estágios do ciclo meiótico pela avaliação da configuração cromossômica nestes oócitos. Entretanto, a avaliação da configuração cromossômica dos oócitos obtidos, ou seja, a não caracterização de Metáfase II em oócitos maduros recém aspirados está de acordo com as constatações feitas por Byers et al 4 em gatas domésticas, onde a maioria dos oócitos aspirados e classificados como maduros, de acordo com critérios morfológicos, ainda não haviam atingido o estágio de Metáfase II.…”

“…3 Oócitos de gata doméstica, aspirados 25 horas após a aplicação de Gonadotropina Coriônica Humana (hCG), foram classificados como maduros, de acordo com critérios morfológicos, mas a maioria deles (60%) não tinha atingido o estágio de Metáfase II, sendo que só atingiram a maturidade nuclear após algumas horas de cultivo adicional. 4 A maioria dos oócitos de gatas domésticas, sujeitos a condição de cultivo, atinge a fase de metáfase II dentro de 30 a 48 horas. 2 Segundo Farstad 5 a eficiência da maturação e da fertilização in vitro em oócitos felinos é geralmente inferior a de outras espécies.…”