Black-stain root disease is a threat to conifer forests in western North America. The disease is caused by the ophiostomatoid fungus Leptographium wageneri (W.B. Kendr.) M.J. Wingf., which is associated with a number of bark beetle (Coleoptera: Scolytidae) and weevil species (Coleoptera: Curculionidae). We developed a polymerase chain reaction test to identify and quantify fungal DNA directly from insects. Leptographium wageneri DNA was detected on 142 of 384 bark beetle samples (37%) collected in Lassen National Forest, in northeastern California, during the years 2001 and 2002. Hylastes macer (LeConte) was the bark beetle species from which Leptographium DNA was amplified most regularly (2001: 63.4%, 2002: 75.0% of samples). Lower insect-fungus association rates were found for Hylurgops porosus (LeConte), Hylurgops subcostulatus (Mannerheim), Hylastes gracilis (LeConte), Hylastes longicollis (Swaine), Dendroctonus valens (LeConte), and Ips pini (Say). The spore load per beetle ranged from 0 to over 1 × 10 5 spores, with only a few beetles carrying more than 1 × 10 3 spores. The technique permits the processing of a large number of samples synchronously, as required for epidemiological studies, to study infection rates in bark beetle populations and to identify potential insect vectors.
Résumé: Le noircissement des racines est une maladie qui menace les forêts de l'ouest de l'Amérique du Nord. La maladie est causée par Leptographium wageneri (W.B. Kendr.) M.J. Wingf., un champignon de la famille des Ophiostomataceae qui est associé à plusieurs espèces de scolytes (Coléoptères : Scolytidae) et de charançons (Coléoptères : Curculionidae). Nous avons mis au point un test de réaction en chaîne de la polymérase pour identifier et quantifier l'ADN fongique directement à partir des insectes. L'ADN de L. wageneri a été détecté sur 142 des 384 (37 %) échan-tillons de scolytes collectés dans la forêt nationale de Lassen, dans le nord-est de la Californie, au cours des années 2001 et 2002. Hylastes macer (LeConte) était l'espèce de scolyte à partir duquel l'ADN de Leptographium a été le plus régulièrement amplifié (2001 : 63,4 %, 2002 : 75,0 % des échantillons). Des taux d'association plus faibles ont été observés pour Hylurgops porosus (LeConte), Hylurgops subcostulatus (Mannerheim), Hylastes gracilis (LeConte), Hylastes longicollis (Swaine), Dendroctonus valens (LeConte) et Ips pini (Say). La charge de spores par insecte variait de 0 à plus de 1 × 10 5 spores, avec seulement quelques insectes transportant plus de 1 × 10 3 spores. La technique permet de traiter simultanément un grand nombre d'échantillons, comme l'exigent les études épidémiologiques pour étudier le taux d'infection dans les populations de scolytes et identifier les insectes vecteurs potentiels. [Traduit par la Rédaction] Schweigkofler et al. 1808