O papel da insularina, uma disintegrina recombinante (GST-INS), em processos de progressão tumoral: estudos <i>in vitro</i>.

Abstract

AGRADECIMENTOSAgradeço às pessoas que contribuíram direta ou indiretamente na elaboração deste trabalho.Em especial à minha orientadora Dra. Maisa Splendore Della Casa pelo incentivo e confiança mais uma vez depositada. Maisa pra mim você é a tradução de ética, competência inesgotável e profissionalismo. Teus ensinamentos tem me dirigido pela vida profissional e tem me dado às asas que preciso para voar. Muito obrigada! Ao meu noivo Alexsandro pelo companheirismo, paciência e pelas palavras que por muitas vezes me tranquilizaram e acalmaram meu coração.Muito obrigada pelo seu amor e cuidado! Às minhas irmãs Gabriela e Isabela por todo amor e carinho. Minhas palavras não são o suficiente para expressar a gratidão e o amor que sinto por vocês. Obrigada por tudo! À aluna de Iniciação Científica, Lilian, muito obrigada pelo companheirismo na bancada, pelas discussões em grupo e pela padronização dos ensaios de TCIPA.À minha amiga querida Amanda por me auxiliar na estatística dos resultados que constam neste trabalho, e pela amizade que vai muito além da bancada. Obrigada por ser tão especial e atenciosa comigo! À minha amiga amada Leijiane, por estar ao meu lado nestes anos, sempre me incentivando e me apoiando. Obrigada por tudo, por me auxiliar no processamento do sangue, pelas conversas científicas (sempre construtivas!) e acima de tudo pela sua amizade! As metástases tumorais resultam de uma complexa cascata molecular que envolve uma série de interações adesivas e processos invasivos. Integrinas estão envolvidas na sobrevivência, proliferação, invasão (mecanismos importantes da metástase) e angiogênese tumoral. A expressão aberrante da integrina αvβ3 aparece em vários tipos de câncer incluindo melanoma metastático humano. Dentro do contexto metastático, plaquetas ligam-se a certas células tumorais e, estudos demonstram que essas células utilizam a integrina αvβ3 para ligar-se à integrina αIIbβ3 de plaquetas, em uma reação cruzada com proteínas do plasma. A integrina αvβ3 também é intensamente estimulada nos processos de angiogênese tumoral. A Insularina (GST-INS) é uma disintegrina recombinante do veneno da Bothrops insularis capaz de inibir a agregação plaquetária via ADP bem como a adesão de células endoteliais ao fibrinogênio. De posse dessas informações, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a capacidade da GST-INS na inibição da angiogênese; na adesão de células endoteliais (HUVECs) e de melanoma humano (SK-MEL-28) às plaquetas e na invasão de células tumorais, através de ensaios in vitro. A viabilidade celular da linhagem utilizada como controle L929 (fibroblasto murino) não foi comprometida através do tratamento com GST-INS em diferentes concentrações e tempos de incubação. Nos ensaios de adesão, em condições estáticas, GST-INS foi capaz de inibir totalmente a adesão de células HUVECs e SK-MEL-28 às plaquetas em comparação ao controle e ao Aggrastat® (inibidor seletivo da integrina αIIbβ3). Além de inibir a TCIPA (agregação plaquetária induzida por células tumorais) a GST-INS também inibiu a invasã...