RESUMO-Algumas classes de agente naturais podem ser empregadas na substituição de agentes químicos nos alimentos, dentre estes, tem-se as bacteriocinas. Estas são formadas por um grupo heterogêneo de peptídeos ou proteínas sintetizadas ribossomicamente que apresentam ação antimicrobiana contra uma vasta gama de micro-organismos patogênicos. Objetivou-se com este estudo a extração de uma bacteriocina produzida e excretada para o meio de cultivo, por Lactobacillus sakei, assim como a determinação da sua concentração mínima inibitória (CMI), frente ao micro-organismo Staphylococcus aureus. Após a obtenção do composto e a sua extração do meio de cultivo fermentado, diluiu-se em água peptonada estéril o extrato em um gradiente de concentrações de 1:2 até 1:12, assim todas as diluições e o extrato bruto foram testados pelo método de análise antimicrobiana em microplacas, contra o micro-organismo de interesse. A partir da análise dos resultados foi possível observar que o extrato apresenta uma ação bactericida no extrato bruto e na diluição de 1:2, a concentração mínima inibitória do composto foi encontrada na diluição de 1:9, na qual ainda apresente inibição do crescimento microbiano. Observa-se a produção de uma bacteriocina pelo Lactobacillus sakei assim como a extração deste composto do meio fermentado e sua ação antimicrobiana eficiente contra o micro-organismo Staphylococcus aureus. INTRODUÇÃO Vários agentes químicos ou sintéticos utilizados para inibição de micro-organismo em alimentos, estão sendo substituídos por agentes naturais. Estes com a mesma ação dos antimicrobianos químicos e sintéticos, todos com a finalidade de matar ou inibir o crescimento de micro-organismos indesejáveis no alimento (OLIVEIRA, et al., 2009). A concentração mínima de um agente antimicrobiano pode ser determinada como sendo a menor quantidade deste composto que será necessária para inibir o crescimento de um micro-organismo escolhido, esta quantidade pode ser denominada como concentração mínima inibitória (CMI). São feitos testes com variação da concentração do agente antimicrobiano, quando esta concentração for a menor possível e ainda apresentar inibição do crescimento do contaminante, essa é definida como CMI (OLIVEIRA, et al., 2009).