Биодеградация кератина пера сельскохозяйственной птицы микроорганизмами, обладающими кератинолитической активностью, представляет альтернативный привлекательный метод повышения питательной ценности отходов и предотвращения загрязнения окружающей среды. Кератинолитические протеазы используются для получения редких аминокислот -пролина, серина и цистеина. Бактериальный гидролизат перьев можно применять в качестве ингредиента корма для животных или органического удобрения, благодаря чему снижается воздействие отходов птицеводства на окружающую среду. В настоящей работе впервые установлено, что при переработке пера цыплят-бройлеров штаммом Bacillus licheniformis БАЛ-2, который использует перо в качестве единственного источника углерода, свободный кератин полностью превращается в перевариваемые пептиды и незаменимые аминокислоты. Цель работы заключалась в изучении морфологических, физиолого-биохимических и молекулярно-генетических свойств штаммов Bacillus licheniformis БАЛ-1 и БАЛ-2, их идентификации и использования для ферментации пера цыплят-бройлеров. Штаммы Bacillus licheniformis БАЛ-1 (ВКПМ В-14243) и БАЛ-2 (ВКПМ В-14244) -природные изоляты, выделенные из донных отложений Финского залива Балтийского моря (д. Кандикюля). Куриное перо цыплят-бройлеров кросса Ross 308 (Птицеперерабатывающий комплекс «Константиново», ПАО «Группа Черкизово», с. Константиново, Московская обл., Раменский р-н) поступило с промышленной линии ощипывания птицы, имело включения крови, влажность 75 % и подвергалось ферментации через 24 ч после получения. Морфотипы колоний B. licheniformis определяли на триптон-соевом агаре. Геномную ДНК бактерий выделяли с использованием набора реагентов («Thermo Scientific», Литва). Фрагмент 16S рДНК амплифицировали в ПЦР со специфичными праймерами для гена 16S рРНК эубактерий: 8f 5-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3 и 1492r 5-TACGGHTACCTTGTTACGACTT-3. Идентичность нуклеотидных последовательностей анализировали с помощью программы BLASTN (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST). Для ферментации пера в колбу, содержащую 100 см 3 минерально-питательной среды, помещали 5 г измельченного пера птицы. Штамм B. licheniformis БАЛ-1 или БАЛ-2 вносили в минеральную среду до конечной концентрации 1½10 6 КОЕ/см 3 . Ферментацию пера проводили в течение 72 ч при 28 С и постоянном перемешивании. В культуральной жидкости определяли кератиназную активность с использованием суспензии кератина. Раствор фермента (1 см 3 ) добавляли к суспензии кератина (1 см 3 ) в реакционном буфере. После 1 ч инкубации при 37 C реакцию останавливали добавлением 2 см 3 5 % ТХУ и раствор фильтровали. Ферментированное перо исследовали методом растровой электронной микроскопии. Двумерный гель-электрофорез выполняли по О'Фарреллу c изоэлектрофокусированием в амфолиновом градиенте pH (IEF-PAGE); белки детектировали последовательным окрашиванием кумасси голубым R-250 и азотнокислым серебром. При подготовке препаратов для 2D электрофореза 100 мг измельченного образца гомогенизировали в 2 см 3 лизирующего раствора. Гомогенат осветляли центрифугированием, фракцию ...