NtCDKG;2, uma proteína multifuncional, relacionada aos processos de transcrição, processamento de RNA e organização do fuso acromático no ciclo celular de <i>Nicotiana tabacum</i>

Abstract

AgradecimentosMeus agradecimentos mais sinceros… À Prof. Dra. Maria Helena de Souza Goldman, por sua excelência e ética profissional. Tu és um exemplo para todos nós! Agradeço também por ser uma orientadora de verdade, por todo apoio, carinho, incentivo. Agradeço também todos bolos e guloseimas que tu trazes para alegrar nossos dias. Ahhh, os bolos... muito, muito obrigada! Ao Departamento de Genética da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, pela valiosa oportunidade e suporte oferecido durante a realização do mestrado e do doutorado. Em especial, agradeço ao Prof. Dr. Ademilson Espencer Egea Soares e à secretária Susie Adriana Penha Nalon pelo incansável apoio, motivação e amizade. À Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, pela utilização de sua estrutura. À CAPES, pelas bolsas concedidas às quais possibilitaram a realização do doutorado no Brasil (PROEX) e no exterior (Processo: BEX 7686/13-7-CAPES/NUFFIC). A CAPES, ao CNPq e a FAPESP por todo o suporte financeiro oferecido para o desenvolvimento da pesquisa em nosso laboratório. À FAEPA, pelo suporte financeiro concedido para a participação de eventos científicos. Aos professores Prof. Dr. Luis Lamberti Pinto da Silva, Silvana Aparecida Creste Dias de Souza e Adriana Pinheiro Martinelli, pelas valiosas sugestões como membros da minha banca de qualificação e também em todos os outros momentos que nos auxiliaram durante as nossas pesquisas. Ao Prof. Dr. Gustavo Henrique Goldman, pela constante disponibilização da estrutura de seu laboratório e pelos auxílios científicos sempre que precisamos. À Prof. Dra. Zilá Luz Paulino Simões, por disponibilizar o acesso à estrutura de seu laboratório e também pelo carinho pelos membros do nosso laboratório. Ao Prof. Dr. John Campbell McNamara, por disponibilizar a sala de estudos onde consegui escrever esta tese. À Dr. Andréa C. Quiapim, por ser o braço direito de todos nós no laboratório e por mantermos uma bela amizade. Obrigada pelas inúmeras ajudas, risadas, brigadeiros, massagens e tudo mais. Ao Dr. Edward, o "Tio Ed", por todos seus ensinamentos e auxílios durante o andamento desta pesquisa.Ao Dr. Juca, por toda "luz" que tu tens trazido às nossas pesquisas, em especial, por nos auxiliar nas interpretações dos dados e mostrar o quanto eles são valiosos! A todos membros do LBMP, meus mais profundos agradecimentos! Ao Pedrito, agradeço por me acompanhar e me deixar te acompanhar nos nossos experimentos overnight. Agradeço por ser tão querido com todos, tão solícito e por ser tão sincero e honesto em tuas amizades. À Fran, agradeço por me ajudar tanto na finalização da minha tese, nas coletas e formatações finais. Agradeço à amizade valiosa que sei que temos e ao carinho e preocupação. Tu és muito especial, nunca esqueça.À Pat, agradeço por ter entrado na minha vida de uma maneira tão intensa, enérgica. Obrigada por trazer vida a todos nós, pelo carinho e amizade sincera. Agradeço também por dividir tua mãezinha querida conosco. Dona There, tenho tanto a te agradecer... Ao Vitor, obrigada por todas...

SCI1 e NtCDKG;2 atuam no ciclo celular, no processamento de RNAs e no desenvolvimento floral em Nicotiana tabacum

“…Como será abordado mais adiante, NtCDKG;2 é uma CDK multifuncional. Entretanto, no que diz respeito ao ciclo celular, foram encontradas evidências de sua participação na formação do fuso mitótico (FERREIRA, 2016;LUBINI, 2016;THOMÉ, 2016THOMÉ, , 2018. Lubini (2016) e Ferreira (2016) observaram que a proteína GFP-NtCDKG;2 se localiza espalhada no nucleoplasma durante a intérfase, porém após a desestruturação do núcleo, essa proteína está associada à região dos cromossomos condensados durante a metáfase e anáfase.…”

“…Entretanto, no que diz respeito ao ciclo celular, foram encontradas evidências de sua participação na formação do fuso mitótico (FERREIRA, 2016;LUBINI, 2016;THOMÉ, 2016THOMÉ, , 2018. Lubini (2016) e Ferreira (2016) observaram que a proteína GFP-NtCDKG;2 se localiza espalhada no nucleoplasma durante a intérfase, porém após a desestruturação do núcleo, essa proteína está associada à região dos cromossomos condensados durante a metáfase e anáfase. Além disso, NtCDKG;2 interage com proteínas importantes para a formação do fuso mitótico, como a Ntβ-tubulina 6 e NtRanBP1 (LUBINI, 2016;THOMÉ, 2018).…”

“…Lubini (2016) e Ferreira (2016) observaram que a proteína GFP-NtCDKG;2 se localiza espalhada no nucleoplasma durante a intérfase, porém após a desestruturação do núcleo, essa proteína está associada à região dos cromossomos condensados durante a metáfase e anáfase. Além disso, NtCDKG;2 interage com proteínas importantes para a formação do fuso mitótico, como a Ntβ-tubulina 6 e NtRanBP1 (LUBINI, 2016;THOMÉ, 2018). Dessa forma, é provável que, durante a metáfase, SCI1 seja degradada e deixe de inibir NtCDKG;2, a qual teria papel na regulação do fuso mitótico durante a metáfase e anáfase.…”

“…Somadas às parceiras de interação de SCI1 com papel no ciclo celular, Pinoti (2016) descreveu parceiras com potencial participação no splicing. Dentre essas parceiras, destacam-se NtU2A', NtSR45, NtRS2Z33, NtDEAD-BOX35, NtHEN2 e NtCycL1;1 (LUBINI, 2016;PINOTI, 2016). Dessas, NtCDKG;2 também interage com NtU2A', NtDEAD-BOX35 e NtCycL1;1 e, adicionalmente, com NtRSZ21 (FERREIRA, 2016;THOMÉ, 2016).…”

“…Quanto ao ciclo celular, em A. thaliana, ambas CDKGs se expressam durante esse processo (MENGES et al, 2005), e interagem com proteínas-chaves de regulação do ciclo (VAN LEENE et al, 2010), porém não foram descritos seus mecanismos de ação. Em N. tabacum, como citado anteriormente, NtCDKG;2 é encontrada durante todo o ciclo celular, e pode ter função na organização do fuso mitótico (LUBINI, 2016;THOMÉ, 2018). Em relação ao florescimento, Ma et al (2015) verificaram que mutantes de A. thaliana com perda de função de CDKG;2 possuem um adiantamento desse processo.…”