Die Trennung von Monophosphat PO:--(I), , Hypophosphit H,POy (111) und Hypodiphosphat P,OQ--(IV) durch Papierelektrophorese') beruht auf der im elektrischen Feld verschieden groOen Wanderungsgeschwindigkeit der Anionen. Nachweis der Flecken gelingt mit einem Spriihreagenz und UV als PhosphomolybdLnblau2). I1 und 111 werden vorher rnit Bromdampf xu I oxydiert. I V bleibt unverandert und gibt rnit dem Spriihreagenz im UV einen charakteristischen himmelblauen Farbton. Die Blaufarbung hangt stark von der Art des Puffers und dem Alter des Spriihreagenzes ab. J e alter dieses ist, um SO geringer ist die Blaufsrbung des Streifens. Durohgehend blau gewordene Streifen konnen mit NH,-Gas wieder aufgehellt werden, ohne daB die die Ionenorte kennzeichnenden Anfarbungen verblassen. (Unveroffentl. Beobachtung von E. Slumpp).Bild 1 Elektropherogramme von Natriumsaizen verschiedener Phosphor-220 Volt, Laufzeit 2% h. a) Unbekanntes Gemisch, b) bekanntes Gemisch sauren. Versuchsbedlngungen: Borat-HCI-Pufferlosung pH = 8, Die relative Wanderungsgeschwindigkeit der Anionen wird gemessed). Bei pA 5 bis 12 wandert I1 am schnellsten, bei pA 8 IV iiberhaupt nicht, sondern zeigt eher eine riicklaufige Tendenz. Bei dem als am giinstigsten erkannten pR 8 (Borat-Puffer) aber wandern I und 111 gleich sohnell. Es ist deshalb nbtig, sie analytisch zu unterscheiden.Ausfiihrung: Fur die Versuche werden beniitzt: Na,HPO,. 2H,O (Merck), N a 2 H P 0 ,~5 H , 0 (Riedel-de Haen), NaH,PO,. H,O (Merck), Na,H,P,06~6 H,O 4 ) . Von den papierchromatographisch auf ihre Reinheit gepriiften Salzen werden 0,l m Losungen hergestellt und fur die einzelnen Versuche 0,00025 birr 0,003 ml verwendet (0,77 bis 18,6y P). Am besten bewahrt sich eine Menge von 0,0005 ml (1,51 bis 3,l y P). Von den Gemischen werden 0,001 ml benbtzt. Auf einen langs halbierten Elphor-Streifen6) (Whatman I ) wird 0,001 ml Losung einige om von einem Ende entfernt aufgebracht. Der Streifen wird von den Enden her so in die Pufferlosung getaucht, daO um die Auftragsstelle etwa 8 cme trocken blciben, und dann iiber den Rahmen gespannt. Liegen alle Streifen iiber dem Rahmen, so werden die noch trockenen Stellen rnit Pufferlosung bespruht, der Rahmen raseh in die Kammer eingesetzt und damit der Stromkreis gesohlossen. Die Laufzeit betragt bei 110 Volt 51/, h, bei 220 Volt 2l/, h. Die Streifen werden rnit warmer Luft auf dem Rahmen vor-, dann auf Filtrierpapier zu Ende getrooknet (etwa 10 min) und in ein hohes Becherglas mit Bromdampf gehangt (1 bis 2 min). Naoh Verfliichtigung uberschiissigen Broms an der Luft wird rnit Spriihreagenz bespriiht und noch feucht mit UV bestrahlt. Nach etwa 1 h hellt man die trockencn Streifen mit NH,-Gas auf und markiert die Anfarbung.Ob I und 111 nebeneinander vorliegen, lBDt sich bequem entscheiden: Zum Naohweis von 111 wird eine etwas konzentrierterc Losung des unbekannten Gemisches in einem Reagenzglas mit gesattigter Ba(NO,),-Losung im UberschuB versetzt6). Der Niederschlag wird durch ein feinporiges Filter filtriert. Von dem nur noch 111 enthaltenden Filtrat l...
