Nachweis von Fragment‐Genesen im Massenspektrometer. 5. Mitteilung Aminosäure‐Sequenzanalyse: Vergleich der DADI/MIKE‐, ‘linked scan’‐ und Kollisionsaktivierungs‐Spektrometrie an aliphatischen Aminosäuren

Abstract

The amino acid sequence in tripeptides and tetrapeptides has been analyzed by DADUMIKE and B/E-'linked stun ' spectrometry, as well as by collisional activation in the first and second field free region of a mass spectrometer embodying the inverse Nier-Johnson geometry. Collisional activation enhances the intensity of fragment ions. Einleitung. -Schon seit langerer Zeit wird die Massenspektrometrie in der Peptidanalytik eingesetzt. Die Aminosauresequenz von Oligopeptiden lasst sich damit an kleinen Substanzmengen ermitteln [ l ] [ 2 ] . In Peptidenwie in anderen Polymeren -I wiederholt sich ein Grundstrukturelement periodisch; das fuhrt zu einer Periodizitat in der massenspektrometrischen Fragmentierung. Entsprechende ionisierte Fragmente lassen sich im konventionellen Massenspektrum nachweisen. Oft sind aber diese wichtigen, sequenzcharakteristischen Ionen nicht leicht zu erkennen, da sie durch Signale konkurrenzierender Fragmentierungen uberdeckt werden. Neue Wege eroffnete die DADI/MIKE-Spektrometrie'), weil damit genetische Beziehungen zwischen einem Ion und dessen Folge-Ionen nachgewiesen werden [3] [4]. Auf diese Weise lassen sich auch sequenzcharakteristische Fragment-Ionen aus Oligopeptiden selektiv verfolgen. Die genetische Reihenfolge und die Masse dieser ausgewahlten Ionen fuhren zur Aminosaure-Sequenz des untersuchten Oligopeptides [5]. Eine solche Analyse lasst sich grundsatzlich auch an unreinen Proben [6] oder an Peptid-Gemischen [7] durchfuhren.

Daughter ion mass spectra from cationized molecules of small oligopeptides in a reflecting time-of-flight mass spectrometer

“…From these, sequence information can readily be deduced but will not be elaborated upon here, since this is self-evident from the tables. Furthermore, the daughter ions from unimolecular decomposition of [ + H]+ ions are similar to those reported by others (2)(3)(4)(5)(6)(7)(8)(9)(10)(11)(12)(13)(14)(15)(16) for collisionally induced decompositions. Instead, some other noteworthy features of the daughter ion spectra are now discussed.…”

“…Figure 5 shows a partial reflected ion spectrum for Leuenkephalin (2) deposited on etched silver, and Figure 6 shows the daughter ion spectra for the various cationized molecules.…”

“…The advantages of daughter ion mass spectra for structural analysis of ions have been well documented. Of particular relevance to this paper are a number of studies of small oligopeptides (1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)(8)(9)(10)(11)(12)(13)(14)(15)(16).…”

“…This instrument (which has a vertical flight tube) is shown schematically in Figure 1 Department of Physics. 2 Department of Chemistry.…”