Multiparametric flow cytometry allows rapid assessment and comparison of lactic acid bacteria viability after freezing and during frozen storage

Rault, Aline; Béal, Catherine; Ghorbal, Sarrah; Ogier, Jean-Claude; Bouix, Marielle

doi:10.1016/j.cryobiol.2007.04.005

Cited by 80 publications

(67 citation statements)

References 33 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Consequently, a cleaved fluorescent, green product (carboxyfluorescein -CF) is deposited in the interior of cells with intact cytoplasmic membranes. Whereas propidium iodine enters cells with damaged cytoplasmic membranes, and intercalates with nucleic acids, therefore cells are stained red (Rault et al 2007). The results based on CFDA cell counts did not reveal any significant differences for Pursept-containing probes up to the MIC concentration, regardless of the culture (P > 0.05).…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 65%

Biofilm formation by Pseudomonas aeruginosa and disinfectant susceptibility of planktonic and biofilm cells

Olszewska¹,

Kocot²,

Aleksandra³

et al. 2016

Czech J. Food Sci.

View full text Add to dashboard Cite

Epifluorescence microscopy (EFM) was used to study the biofilm formation of Pseudomonas aeruginosa after 6, 24, 30, 48, 54, 72, 78, and 96 h growth in a chamber slide system. For this purpose, the biofilm was stained with the Live/Dead BacLight, wherein live and dead cells were visualised based on the cell membrane integrity. With the use of EFM we described 8- of 9-stage biofilm characteristics after 78 h of growth, since the majority of microscopic fields were fully covered with attached cells. However, the 96-h growth resulted in the cell detachment and revealed 30% of dead cells of all those cells that remained on the surface. The susceptibility testing of planktonic and biofilm cells to two disinfectants, chlorine-based and quaternary ammonium compound-based, revealed that biofilm cells were more tolerant to a chlorine-based sanitiser than planktonic counterparts. P. aeruginosa was inhibited by lower concentrations of the quaternary ammonium compound-based sanitiser than the chlorine-based sanitiser, which on the other hand was more effective in cell inactivation, as both the MIC/MBC (inhibitory/bactericidal) measurement and the CFDA/PI (carboxyfluorescein diacetate/propidium iodide) staining indicated.

show abstract

Section: Resultsmentioning

confidence: 65%

Biofilm formation by Pseudomonas aeruginosa and disinfectant susceptibility of planktonic and biofilm cells

Olszewska¹,

Kocot²,

Aleksandra³

et al. 2016

Czech J. Food Sci.

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Innym powodem niedokładności mogą być trudności z doborem podłoża hodowlanego oraz warunków inkubacji, wynikające z wysokich wymagań odżywczych i środowiskowych bakterii fermentacji mlekowej i z niepewności ich optymalizacji dla gatunku, a nawet szczepu. Należy również uwzględnić występowanie w populacji komórek niezdolnych do wzrostu na podłożach hodowlanych, czyli w stadium VBNC [25,28,29]. Zmiana stanu fizjologicznego LAB indukowana przez stres komórkowy objawia się najszybciej zahamowaniem procesów rozmnażania.…”

Section: Stadium Vbnc Bakterii Fermentacji Mlekowej a Techniki Służącunclassified

“…Stosowanie różnych barwników fluorescencyjnych umoż-liwia m.in. badanie stabilizacji błon cytoplazmatycznych, genomu, pH wewnątrzko-mórkowego, aktywności enzymatycznej czy elektrochemicznego potencjału membranowego komórek bakterii [22,25].…”

Section: Stadium Vbnc Bakterii Fermentacji Mlekowej a Techniki Służącunclassified

“…Rault i wsp. [25], w celu oceny użyteczności parametrycznego barwienia CFDA/PI (ang. carboxyfluorescein diacetate/propidium iodine), w badaniach przeżywalności szczepów Lactobacillus delbrueckii, podczas głęboko mrożonego przechowywania wyraźnie wskazują na zalety tej techniki, która okazała się pomocna w wyróżnieniu subpopulacji komórek żywych, martwych i uszkodzonych w wyniku panujących warunków.…”

Section: Stadium Vbnc Bakterii Fermentacji Mlekowej a Techniki Służącunclassified

See 1 more Smart Citation

Responses of Lactic Acid Bacteria to Stress – VBNC State

Olszewska¹,

Łaniewska-Trokenheim²

2013

ZNTJ

View full text Add to dashboard Cite

S t r e s z c z e n i eStadium VBNC (ang. viable but nonculturable) oznacza populację żywych komórek bakteryjnych, niewykazującą wzrostu na podłożach mikrobiologicznych. Stan ten wśród bakterii fermentacji mlekowej mogą wywołać: zmienne warunki temperaturowe, obniżone pH środowiska, obecność soli żółci i innych substancji bakteriostatycznych. Populacji zachowującej stadium VBNC nie można badać tradycyjnymi metodami z uwagi na ograniczające kryterium, jakim jest zdolność wzrostu bakterii na podłożach mikrobiologicznych. Stosowanie technik, które służą badaniu różnych anatomicznych lub/i fizjologicznych parametrów komórek, niezależnie od ich zdolności do wzrostu na podłożach hodowlanych, jest uzasadnione w aspekcie oceny bakterii fermentacji mlekowej pod względem przydatności, funkcjonalności i bezpieczeństwa.Słowa kluczowe: stadium VBNC, bakterie fermentacji mlekowej, czynniki stresowe, techniki badania stadium VBNC

show abstract

“…Most of the cells stained with PI likely had reversible damage and were able to recover and grow in optimal culture conditions. Some studies have demonstrated, for many microorganisms, a high correlation between the plate count and flow cytometry methods [20,21,22], while others have shown that flow cytometry analysis is not an indicator of cultivability [23,24]. These variations may be related to differences in the species and strains tested, as well as in the dyes and equipment used for analysis.…”

Section: Analysis By Plate Countmentioning

confidence: 99%

Flow Cytometric Assessment of Lactococcus Lactis Isolates Viability after Lyophilization

Leandro¹

2014

IJNFS

View full text Add to dashboard Cite

Abstract:Lactococcus lactis strains tolerance to the lyophilization process is one of the criteria used during the selection of starter cultures in cheese production. The viability of L. lactis strains isolated from silage and milk after the lyophilization process was evaluated in the present study by flow cytometry and cell plate counting. The LIVE/DEAD BacLight TM kit, which contains the dyes SYTO 9 and propidium iodide, was used to stain the cells for flow cytometry analysis. The dried cells were also plated on M17 agar and incubated at 30 °C for 24 hours. The strain L. lactis LBU.1, isolated from buffalo milk, showed the highest tolerance to the lyophilization process, according to flow cytometry and cell plate counting. Although the strains of L. lactis isolated from silage were not the most resistant to the lyophilization process, it is noteworthy that, compared to strains isolated from conventional sources such as cow and goat milk, L. lactis strains from silage showed higher tolerance to the lyophilization process.

show abstract

Multiparametric flow cytometry allows rapid assessment and comparison of lactic acid bacteria viability after freezing and during frozen storage

Cited by 80 publications

References 33 publications

Biofilm formation by Pseudomonas aeruginosa and disinfectant susceptibility of planktonic and biofilm cells

Biofilm formation by Pseudomonas aeruginosa and disinfectant susceptibility of planktonic and biofilm cells

Responses of Lactic Acid Bacteria to Stress – VBNC State

Flow Cytometric Assessment of Lactococcus Lactis Isolates Viability after Lyophilization

Contact Info

Product

Resources

About