Movement of motor and cargo along cilia

Two anterograde intraflagellar transport motors cooperate to build sensory cilia on C. elegans neurons

“…Fluorescence Microscopy: Intraflagellar transport was assayed as described previously [15][16][17] . Images were collected on an Olympus microscope equipped with a 100X, 1.35 NA objective and an Ultraview spinning disc confocal head 17 at 2-3 frames/second for 2-3 mins, with the transgenic worms anesthetized with 10mM levamisole, mounted on agarose pads and maintained at 21ºC.…”

“…To investigate if these two domains could be built by distinct IFT pathways we watched the motility of specifically-labeled IFT-motors and IFT-particles within sensory cilia on chemosensory neurons of C. elegans using time-lapse fluorescence microscopy 15 . Previously we observed IFT-particles moving base-to-tip at unitary rates of 0.7µm/s 15,16 , but with improved optics and kymography 17 we find that IFT-particles move anterogradely at two rates; 0.7µm/s along the middle segment then accelerating to 1.3 µm/s along the distal segment (Figs. 2, S1; Table 1).…”

Assembly of primary cilia

“…2, inset). IFT particle movement has subsequently been observed in cilia of C. elegans sensory neurons and in primary cilia of cultured IMCD3 and LLC-PK1 kidney cells using GFP-tagged IFT particle proteins and/or motor subunits, although the rates of particle movement measured in these cell types were slower than those measured in Chlamydomonas (Follit et al, 2006;Orozco et al, 1999;Snow et al, 2004). Kulaga et al, 2004;Nachury et al, 2007 BBS-2 Vesicle transport (?)…”

Élongation de l’axonème et dynamique du transport intraflagellaire

“…Des études in vitro ont permis de révéler l'organisation moléculaire de ces deux complexes [18]. Les protéines des complexes IFT sont localisées le long de l'axonème, mais une proportion significative d'entre elles sont concentrées à la base du flagelle [16,[19][20][21][22]. L'expression de ces protéines fusionnées à la GFP (green fluorescent protein) permet de révéler leur mouvement au sein des cils et flagelles [19,21,23].…”

“…Les protéines des complexes IFT sont localisées le long de l'axonème, mais une proportion significative d'entre elles sont concentrées à la base du flagelle [16,[19][20][21][22]. L'expression de ces protéines fusionnées à la GFP (green fluorescent protein) permet de révéler leur mouvement au sein des cils et flagelles [19,21,23]. Les trains de particules, et donc de protéines, sont transportés par la kinésine II jusqu'à l'extrémité distale, puis repartent rapidement dans le sens opposé par l'intermédiaire de la dynéine.…”