Molecular Evidence of a New Strain of Ehrlichia canis from South America

Abstract

Blood samples from dogs with clinical signs compatible with ehrlichiosis were examined for infection of Ehrlichia canis using PCR, multiplex real-time PCR, and DNA sequencing analysis. Eleven of 25 samples were positive for a new strain of E. canis. This is the first molecular identification of E. canis infection in dogs from Peru.

Investigação molecular de Ehrlichia spp. e Anaplasma platys em felinos domésticos: alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas

“…Entretanto, uma análise comparativa entre a PCR (gene DSB) e a nested-PCR (16S rRNA), realizada em 24 amostras sangüíneas de cães naturalmente infectados por E. canis, demonstrou que as duas técnicas são adequadas ao diagnóstico da erliquiose monocítica canina (Machado 2004). Outros alvos moleculares, especíϐicos para a identiϐicação de seqüências do DNA de E. canis e utilizados em PCR de etapa única, vêm demonstrando serem igualmente sensí-veis e especíϐicos em relação à técnica de nested-PCR, com as vantagens adicionais de reduzirem falsos-positivos devido à contaminação por produtos da PCR da primeira etapa, além de abreviar o tempo de execução (Alves et al 2005;Marsílio et al 2006;Vinasco et al 2007). Doyle et al (2005), desenvolveram um protocolo de PCR em tempo real (real--time PCR) no qual é possível detectar e diferenciar importantes espécies de Ehrlichia em uma única reação de ampliϐicação do gene dsb, com satisfatória sensibilidade analítica.…”

Diagnostic Evaluation of <i> Ehrlichia</i> <i>canis</i> Human Infections

“…For these reasons, if ehrlichiosis is suspect in seronegative patients, diagnosis should be repeated after 2 -3 weeks. In the dogs specific IgG antibodies is greater than 1:80, confirm the diagnosis, but also the titer of less than 1:80 repeat for 2 -3 weeks, or PCR or WB test [18] [19].…”

Identificación molecular de Ehrlichia canis en un canino de la ciudad de Arica, Chile

“…Es altamente probable que este hallazgo esté en relación con la presencia de este agente ehrlichial en Perú, país limítrofe a esta ciudad y donde fue identificado hace algunos años en perros sintomáticos e infestados por garrapatas 15 . El libre tránsito de caninos entre ciudades y localidades cercanas a la frontera muy probablemente ha permitido el ingreso de este agente a nuestro país y su establecimiento pudo haberse visto facilitado por la presencia del vector en la ciudad.…”

“…Para identificar la especie de Ehrlichia se secuenció el producto de la primera RPC con el partidor reverso EHR-OUT2 obteniendo un fragmento de 210 pares de bases. Esta secuencia mostró homología de 100% con la cepa de E. canis (DQ915970.1) reportada en Perú en el año 2007 15 (Tabla 1). Se construyó un árbol filogenético basado en las secuencias del gen 16S ARNr utilizando el método del vecino más próximo (Neighbor-Joining); la matriz de distancia se calculó a través del método Kimura (two-parameter) con un análisis de confianza (bootstrap) de 1.000 replicaciones (Figura 1).…”