Molecular diagnosis of leishmaniasis

Tavares, Carlos Alberto Pereira; Fernandes, Ana Paula; Melo, Maria Norma

doi:10.1586/14737159.3.5.657

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“…Apesar das limitações apresentadas, o teste parece ser promissor para uso em programas de saúde pública, pois requer pequena quantidade de sangue periférico, é de rápida execução e leitura (10 minutos) e pode ser utilizado em condições de campo. Recentemente, o teste foi modificado sendo acrescido do antígeno recombinante rK26 do complexo L. donovani, que também reconhece anticorpos específicos para espécies deste complexo 39 . Na avaliação do novo TRALd foi observado que indivíduos assintomáticos negativos ao rK39 mostraram-se positivos com o rk26, concluindo-se que o novo TRALd amplia a sensibilidade do teste 34 .…”

Section: Diagnóstico Imunológico Diagnóstico Imunológico Diagnóstico unclassified

“…Diferentes tipos de amostras biológicas, tais como aspirados esplênicos, de medula óssea, de linfonodos, sangue total, camada leucocitária, cultura e sangue coletado em papel-filtro, podem ser utilizados como fonte de material para as reações 39 . A hibridização do DNA foi o primeiro método de biologia molecular desenvolvido para diagnóstico.…”

Section: Métodos Moleculares Como Instrumento Métodos Moleculares Comunclassified

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Leishmaniose visceral no Brasil: quadro atual, desafios e perspectivas

Gontijo

Melo

2004

Rev. bras. epidemiol.

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389

203

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No Brasil, a importância da leishmaniose visceral reside não somente na sua alta incidência e ampla distribuição, mas também na possibilidade de assumir formas graves e letais quando associada ao quadro de má nutrição e infecções concomitantes. A crescente urbanização da doença ocorrida nos últimos 20 anos coloca em pauta a discussão das estratégias de controle empregadas. Neste artigo foram analisados os principais aspectos biológicos, ambientais e sociais que influenciaram no processo de expansão e urbanização dos focos da doença. Os métodos disponíveis para o diagnóstico e tratamento não apresentam a eficácia e aplicabilidade desejadas, embora avanços promissores tenham sido alcançados com as pesquisas de novos testes diagnósticos e drogas terapêuticas. As medidas de controle da doença até agora implementadas foram incapazes de eliminar a transmissão e impedir a ocorrência de novas epidemias. É feita uma breve análise destas medidas e dos desafios a serem enfrentados. A prevenção da doença nos cães através da imunoprofilaxia aparece como uma alternativa para o controle. Uma nova vacina para cães, já testada em campo, está sendo industrializada e será comercializada no Brasil a partir de 2004. Apesar da existência de inúmeros estudos sobre a leishmaniose visceral humana e canina, muitas lacunas ainda precisam ser preenchidas.

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Section: Diagnóstico Imunológico Diagnóstico Imunológico Diagnóstico unclassified

Section: Métodos Moleculares Como Instrumento Métodos Moleculares Comunclassified

Leishmaniose visceral no Brasil: quadro atual, desafios e perspectivas

Gontijo

Melo

2004

Rev. bras. epidemiol.

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389

203

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“…The serological diagnosis of VL has been based on the detection of antileishmanial antibodies in serum samples of patients. However, these tests have problems related to their sensitivity and/or specifi city (13) . The parasitological diagnosis is based on the demonstration of amastigote forms in collected specimens; however, these tests require invasive procedures for sample collection, which limit their use in large-scale epidemiological studies (14) .…”

Section: Introductionmentioning

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New delivery systems for amphotericin B applied to the improvement of leishmaniasis treatment

Chávez-Fumagalli

Ribeiro

Castilho

et al. 2015

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

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Leishmaniasis is one of the six major tropical diseases targeted by the World Health Organization. It is a life-threatening disease of medical, social and economic importance in endemic areas. No vaccine is yet available for human use, and chemotherapy presents several problems. Pentavalent antimonials have been the drugs of choice to treat the disease for more than six decades; however, they exhibit high toxicity and are not indicated for children, for pregnant or breastfeeding women or for chronically ill patients. Amphotericin B (AmpB) is a second-line drug, and although it has been increasingly used to treat visceral leishmaniasis (VL), its clinical use has been hampered due to its high toxicity. This review focuses on the development and in vivo usage of new delivery systems for AmpB that aim to decrease its toxicity without altering its therapeutic efficacy. These new formulations, when adjusted with regard to their production costs, may be considered new drug delivery systems that promise to improve the treatment of leishmaniasis, by reducing the side effects and the number of doses while permitting a satisfactory cost-benefit rati

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“…Aunque el análisis de isoenzimas continúa siendo la técnica de referencia para la tipificación, es un proceso demorado y muy laborioso, por lo que otros métodos, basados en la PCR y sus variantes, se han utilizado para discriminar entre las especies causantes de las lesiones cutáneas (14,15). En el caso de la PCR-RFLP, la posibilidad de aplicar la técnica a muestras clínicas fue un factor decisivo para nuestros propósitos.…”

Section: Consideraciones éTicasunclassified

PCR-RFLP y RAPD para la tipificación de Leishmania neotropical

et al. 2008

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Introducción. El análisis de la longitud de los fragmentos de restricción del producto amplificado y el estudio del ADN polimórfico amplificado al azar han demostrado ser herramientas útiles para la tipificación de Leishmania. Objetivos. Estudiar la utilidad de las técnicas moleculares para la identificación y tipificación de cepas de referencia de Leishmania spp. del Nuevo Mundo y valorar su aplicabilidad a muestras clínicas. Materiales y métodos. Se aplicó PCR para amplificar el gen que codifica la cisteíno-proteinasa B, y el análisis de la longitud de los fragmentos de restricción del producto amplificado utilizando ácido desoxirribonucleico de 16 cepas de referencia de Latinoamérica y de muestras clínicas de pacientes colombianos con leishmaniasis, y la técnica del ácido desoxirribonucleico polimórfico amplificado al azar utilizando ocho cepas de referencia. Se establecieron los patrones de bandas en cada caso. Resultados. Se obtuvo producto de amplificación en la PCR para Leishmania braziliensis, L. peruviana, L. panamensis y L. guyanensis. Para el resto, no fue posible amplificar el gen con los cebadores utilizados. La restricción mostró un patrón de bandas común para L. peruviana, L. guyanensis y L. panamensis, mientras L. braziliensis, presentaba un perfil individual único. El análisis de restricción del producto amplificado generó un patrón de bandas similar en los cinco pacientes estudiados, que se correspondía con el patrón generado por L. peruviana, L. guyanensis o L. panamensis. Mediante la amplificación al azar se obtuvieron patrones de bandas reproducibles con todas las cepas estudiadas, que posibilitaron la diferenciación. Se discuten las ventajas y limitaciones de ambos procederes. Conclusiones. El combinar ambas metodologías resultaría útil para identificar especies de importancia médica, tomando en cuenta sus ventajas y desventajas.Palabras clave: Leishmania, leishmaniasis/diagnóstico, reacción en cadena de la polimerasa, polimorfismo de longitud del fragmento de restricción. PCR-RFLP and RAPD for typing neotropical LeishmaniaIntroduction. The analysis of the PCR-restriction fragment length polymorphism and random amplified polymorphic DNA have been useful tools for Leishmania identification.Objectives. Molecular procedures were demonstrated for identification and typing of reference strains of New World Leishmania and their applicability was validated for clinical samples. Materials and methods. DNA was extracted from 16 reference strains of Latin American Leishmania as well as from clinical samples of leishmaniasis patients. A sequence coding for cysteine proteinase B was amplified by PCR and subjected to restriction fragment length polymorphism analysis. The enzyme used was Taq1. For eight of the reference strains, the random amplified polymorphic desoxyribonucleic acid technique (RAPD) was applied. Band patterns for Leishmania species differentiation were established each each method. The sample size of the clinical sample was of 5.

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Molecular diagnosis of leishmaniasis

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Leishmaniose visceral no Brasil: quadro atual, desafios e perspectivas

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New delivery systems for amphotericin B applied to the improvement of leishmaniasis treatment

PCR-RFLP y RAPD para la tipificación de Leishmania neotropical

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