Molecular cloning of a putative agglutination/immobilization antigen located on the surface of a novel agglutination/immobilization serotype ofCryptocaryon irritans

Abstract

A surface agglutination/immobilization antigen was purified from the novel agglutination/immobilization serotype (serotype G37) of the ciliated protozoan Cryptocaryon irritans, a parasite of seawater fishes. Serum from fish immunized with C. irritans theronts had agglutination/immobilization activity against theronts in vitro. However, fish and rabbit antisera raised against serotype G32 (reported previously) caused little agglutination/immobilization of serotype G37 theronts. Immunological analysis indicated that the 37 kDa theront surface membrane protein may be the agglutination/immobilization antigen of this serotype. The full-length 37 kDa antigen cDNA contained 1171 base pairs, encoding a 331-amino acid protein with hydrophobic N- and C-termini, which are characteristically found in proteins containing a C-terminal glycosylphosphatidylinositol anchor. In addition, the genetically characterized nucleotide sequences of the first internal transcribed spacer region of ribosomal DNA of these 2 serotypes were compared. The internal transcribed spacer rDNA sequence of serotype G32 was identical to that of isolates from Pingtung, Taiwan, and from the USA. On the other hand, the sequences of serotype G37 were not identical to those of any C. irritans isolate.

Perbandingan Filogenetik Protein Antigen-I yang Berpotensi Sebagai Calon Diagnostik dan Vaksin terhadap Parasit Cryptocaryon irritans

“…Antigen ini juga dikenali sebagai antigen imobilisasi (antigen-i) C. irritans (Hatanaka et al 2008). Kehadiran antigen-i dikesan dalam siliat yang hidup bebas seperti Tetrahymena thermophila dan Paramecium aurelia (Hansma & Kung 1975) serta organisma siliat yang patogenik kepada ikan seperti I. multifiliis (Clark et al 2001) dan Philasterides dicentrarchi (Iglesias et al 2003).…”

“…Kajian terdahulu membuktikan kewujudan variasi dalam antigen-i pada serotip C. irritans yang sama serta serotip yang berbeza (Hatanaka et al 2008). Fenomena ini adalah selaras dengan antigen-i pada organisma siliat lain yang pernah dilaporkan (Bannon et al 1986;Dickerson et al 1993;Hansma & Kung 1975).…”

“…Tambahan lagi, protein rekombinan antigen-i bersifat imunogen dan melindungi ikan yang telah diimunisasi daripada dijangkit oleh C. irritans (Hatanaka et al 2008;Josepriya et al 2015Josepriya et al , 2012. Salah satu masalah dengan penggunaan antigen-i sebagai vaksin atau penanda diagnostik adalah kewujudan variasi pada antigen-i serotip C. irritans yang berbeza.…”

“…Salah satu masalah dengan penggunaan antigen-i sebagai vaksin atau penanda diagnostik adalah kewujudan variasi pada antigen-i serotip C. irritans yang berbeza. Ikan yang diimunisasikan dengan antigen-i satu serotip C. irritans tidak dapat mengesan antigen-i serotip C. irritans yang lain (Hatanaka et al 2008;Misumi et al 2011). Tambahan pula, ikan yang diimunisasi dengan teron menunjukkan tahap perlindungan yang lebih tinggi berbanding ikan yang diimunisasikan dengan trofon atau tomon (Bai et al 2008).…”

“…Penanda molekul yang dikenal pasti boleh digunakan untuk menyaring stok ikan yang baru sebelum ianya dimasukkan ke dalam sangkar laut atau menentukan kemungkinan kehadiran parasit tersebut dalam sistem marikultur secara berkala. Kajian ini bertujuan untuk menganalisa pelbagai antigen-i yang pernah dilaporkan (Hatanaka et al 2008(Hatanaka et al , 2007Josepriya et al 2012 (Thompson et al 1997). Kaedah maximum parsimony (MP) dilakukan menggunakan perisian PHYLIP (Felsenstein 1989) melalui satu siri analisis yang berturutan menggunakan PROTPARS dan CONSENSE diikuti dengan penjanaan pohon-pohon MP menggunakan MEGA4 (Tamura et al 2007).…”