Modulación de la expresión de la L-selectina por agentes quimiotácticos y GM-CSF

Abstract

La L-selectina es una molécula de adhesión que se expresa constitutivamente en la membrana de los granulocitos, monocitos y linfocitos, células en las cuales interviene en los procesos iniciales de migración hacia los sitios de inflamación y órganos linfoides. Una vez que dichas células son activadas, la L-selectina experimenta un proceso de regulación negativa con la liberación de un fragmento soluble. Con el objetivo de analizar el efecto de algunos agentes quimiotácticos fisiológicos y un estimulante artificial sobre la expresión de la L-selectina en la superficie de los granulocitos de sangre periférica, se evaluó ésta por citometría de flujo en leucocitos no estimulados y luego de su incubación con un éster de forbol (PMA), dos agentes quimiotácticos (fMLP y LTB4) y una citocina (GM-CSF). En condiciones basales, la expresión de la L-selectina se encontró en un porcentaje alto (95,03 ± 0,67); la estimulación con PMA indujo una disminución notable en la expresión de esta molécula (3,16 ± 0,63). Los factores quimiotácticos llevaron también a una reducción significativa (69,89 ± 4,96 para LTB4 y 53,70 ± 4,30 para fMLP), mientras que la incubación con GM-CSF no produjo cambios significativos con respecto a la expresión basal (89,08 ± 4,81). Al comparar las diferentes condiciones de estimulación entre ellas, se observó que el efecto del PMA fue significativamente mayor que los demás estímulos; además, cuando se comparó la reducción de la expresión generada por el fMLP y el LTB4 también se encontró que entre ellas existía una diferencia estadísticamente significativa. Estos resultados sugieren que el grado de activación alcanzado por los granulocitos se relaciona directamente con la capacidad para liberar la L-selectina desde su superficie, siendo ésta menos intensa después de la acción de estímulos fisiológicos como los agentes quimiotácticos; si bien el GM-CSF activa funciones importantes en la fisiología de los granulocitos, no induce la pérdida de la L-selectina desde la membrana celular.Palabras clave: L-selectina, granulocitos, agentes quimiotácticos, GM-CSF. Modulation of L-selectin expression by chemotactic factors and a cytokine, GM-CSFL-selectin is an adhesion molecule with constitutive expression located on the membrane of granulocytes, monocytes and lymphocytes. It is involved in the early stages of migration of these cells toward either the sites of inflammation or lymphoid tissues. After the cells are activated, Lselectin is down-regulated with shedding of a soluble fragment. Flow cytometry was used to measure L-selectin expression levels on the granulocyte surface, after incubation with a phorbol esther (PMA), two chemotactic factors (fMLP and LTB4) and a cytokine (GM-CSF). Under basal conditions, the expression of L-selectin was found in a high percentage (95.0 ± 0.7) of granulocytes; PMA stimulation led to a marked decrease in expression (3.2 ± 0.6). Chemotactic factors also led to a significant decrease in L-selectin expression (69.9 ± 5.0 for LTB4, and 53.70 ± 4.3 for fMLP), whereas the incubati...

Evaluación de la función de los granulocitos en el síndrome de hiperinmunoglobulinemia E con infecciones recurrentes.

“…Este efecto no se debió al GM-CSF, pues la incubación de los granulocitos con este factor no disminuyó significativamente la expresión de la L-selectina, además la incubación de las células con los sobrenadantes más el anticuerpo anti GM-CSF no mejoró significativamente la expresión observada en la incubación de las células con los sobrenadantes solos. Así mismo, previamente habíamos demostrado que el GM-CSF no tenía un efecto modulador importante sobre la expresión de la L-selectina (32). Se ha sugerido que la regulación negativa en la expresión de la Lselectina es un mecanismo fisiológico que se desencadena con la activación celular (33,34); así, la disminución significativa en la expresión de la L-selectina en los granulocitos del grupo de pacientes con SHIEIR puede explicarse por la combinación de una mayor respuesta a los factores activadores más la presencia de sustancias proinflamatorias presentes en los sobrenadantes de cultivo.…”