Modern Technologies and Approaches to Apoptosis Studies in Experimental Biology

Abstract

Резюме. Обзор посвящен анализу методологических подходов, применяемых в настоящее время для изучения апоптоза у беспозвоночных и позвоночных животных при помощи проточной цитофлюориметрии. Процесс апоптоза сопровождается специфическими изменениями морфологии и биохимии клетки, характерными для всех эукариотических клеток. На представителях различных групп животных детально рассмотрены методы и подходы, позволяющие анализировать морфологические изменения клеток и изменения липидного состава их плазматических мембран, определять уровень активации внутриклеточных ферментов и компонентов каскада каспаз, степень фрагментации ДНК, так же как и нарушения функционирования митохондрий. Апоптоз является одним из ключевых механизмов поддержания постоянства внутренней среды многоклеточного организма, и его оценка является необходимой составляющей фундаментальных и прикладных исследований в экспериментальной биологии и иммунологии. Набор методов определения апоптоза достаточно велик, и предпочтение исследователя определяется конкретными задачами и техническими возможностями лаборатории.

Necrotic and apoptotic changes of neutrophils and mononocytes of blood in experimental periodontitis and their corrections by quercetin

“…Early apoptotic cells are Annexin V-positive and PI-negative (Annexin V-FITC + /PI) indicates activation of caspases in the cellular cytoplasm, but the integrity of surface membrane is not affected. Late apoptosis / necrosis (end-stage) cells are Annexin V/ PI-double-positive (Annexin V-FITC + /PI + ) are also evidence of activation of caspases in the cellular cytoplasm, but there is a fragmentation of the surface membrane [26].…”

Spontaneous and activation-induced apoptosis of peripheral blood mononuclear cells in the pathogenesis of type 1 diabetes mellitus

“…Апоптоз лимфоцитов и диабет 1 типа Lymphocyte apoptosis and diabetes 2020, Vol. 22 [4,6,12]. В основе метода лежит взаимодействие красителя этидиум бромида с ДНК апоптотических клеток, после чего исследуемые образцы подвергают проточной цитометрии.…”

Approaches to Biomaterials Testing According to Modern Biocompatibility Paradigm

“…В такой ситуации оценка пролифератив-ной активности клеток оказывается очень важным тестом для описания биосовместимых свойств биоматериала. При оценке пролиферации клеток после культивирования на материале можно ис-пользовать следующие методы [26]:…”

“…Для оценки окислительного стресса после культивиро-вания на материале можно использовать следую-щие методы [26]: 1) ДНК-микрочипирование для оценки экспрес-сии генов супероксиддисмутазы, глутатион перок-сидазы, глутатион-S-редуктазы, белков теплового шока, гемоксигеназы-1;…”