Methods for selection of Daphnia resting eggs: the influence of manual decapsulation and sodium hypoclorite solution on hatching rates

Abstract

Cladocerans are able to produce resting eggs inside a protective resistant capsule, the ephippium, that difficults the visualization of the resting eggs, because of the dark pigmentation. Therefore, before hatching experiments, methods to verify viable resting eggs in ephippia must be considered. This study aimed to evaluate the number of eggs per ephippium of Daphnia from two tropical aquatic ecosystems and the efficiency of some methods for decapsulating resting eggs. To evaluate the influence of methods on hatching rates, three different conditions were tested: immersion in sodium hypochlorite, manually decapsulated resting eggs and intact ephippia. The immersion in hypochlorite solution could evaluate differences in numbers of resting eggs per ephippium between the ecosystems studied. The exposure to sodium hypochlorite at a concentration of 2% for 20 minutes was the most efficient method for visual evaluation and isolation of the resting eggs. Hatching rate experiments with resting eggs not isolated from ephippia were underestimated (11.1 ± 5.0%), showing the need of methods to quantify and isolate viable eggs. There were no differences between the hatching rate of resting eggs submitted to hypochlorite solution (47.2 ± 7.34%) and manually decapsulated (53.7 ± 13.24%). However, the immersion in hypochlorite was a more efficient technique, faster and not requiring manual ability.Keywords: Daphnia, ephippium decapsulation, techniques, resting eggs viability.Técnicas para seleção de ovos de resistência de Daphnia: influência do desencapsulamento manual e imersão em solução de hipoclorito nas taxas de eclosão ResumoCladóceros são capazes de produzir ovos de resistência envoltos por uma cápsula protetora, o efípio, que dificulta a visualização do número de ovos, devido à pigmentação escura. Assim, antes da condução de experimentos de eclosão, métodos para determinar o número de ovos de resistência viáveis no interior do efípio devem ser utilizados. Este estudo teve como objetivo avaliar o número de ovos por efípio de Daphnia de dois ecossistemas aquáticos tropicais e a eficiência de alguns métodos de desencapsulamento de ovos de resistência. Para avaliar a influência dos métodos na taxa de eclosão foram testadas três condições: imersão em hipoclorito de sódio, ovos de resistência desencapsulados manualmente e efípios intactos. A imersão em solução de hipoclorito permitiu avaliar as diferenças no número de ovos de resistência por efípios entre os ecossistemas. A exposição ao hipoclorito de sódio a uma concentração de 2% durante 20 minutos foi o método mais eficiente para a avaliação visual e isolamento dos ovos de resistência. A taxa de eclosão de ovos não isolados de efípios foi subestimada (11,1 ± 5,0%), mostrando a necessidade de métodos para quantificação e isolamento dos ovos. Não foi verificada diferença de eclosão entre os ovos isolados a partir da imersão em solução de hipoclorito (47,2 ± 7,34%) e manualmente desencapsulados (53,7 ± 13,24%). Entretanto, a imersão em hipoclorito é uma técnica mais ...

An efficient method for hatching diapausing embryos of Daphnia pulex species complex (Crustacea, Anomopoda)

“…Consistent with Davison (), our high rates of hatching demonstrate the efficacy of UV light on activating Daphnia diapausing embryos. The hatching rate in our experiment is much higher than the rates reported in previous work (e.g., Paes et al, ) where white light is commonly used. In our own experiments, we also found that UV light performed better than white light in stimulating the hatching of diapausing embryos of AroMoose and had similar performance as white light in DBIV‐2.…”

“…Several previous studies (Davison, ; Paes, Rietzler, & Maia‐Barbosa, ; Pancella & Stross, ; Radzikowski et al, ; Schwartz & Hebert, ; Vandekerkhove et al, ) investigated the environmental conditions conducive for diapausing embryo hatching in Daphnia , providing insight into how to hatch these embryos in a laboratory setting (Table ). The set of suitable conditions, which largely simulate the seasonal environmental changes in spring, is reflected in the common practice seen in recent literature (e.g., Heier & Dudycha, ; Innes & Hebert, ).…”

“…Decapsulation of embryos has been shown to significantly increase the hatching rate compared with capsulated embryos (Davison, ). Furthermore, bleach treatment shows no significant difference in hatching rate compared with manual decapsulation (Paes et al, ), with a hatching rate around 50%.…”

Produção e viabilidade de ovos de resistência do cladocera Daphnia magna Straus, 1820 em cultivo intensivo

“…De forma similar, Paes et al (2016) destacaram que a descapsulação dos efípios foi fundamental para aumentar as taxas de eclosão, e o uso de cloro atuou como um facilitador no processo, como também observado neste trabalho.…”

No support for a meiosis suppressor inDaphnia pulex: Comparison of linkage maps reveals normal recombination in males of obligate parthenogenetic lineages

“…Differences in male numbers used and in the duration of ephippia production were explained by the fact that many ephippia from the OP x CP cross were empty (i.e., did not contain any viable embryos) and because we wanted to ensure that we would be able to obtain a sufficient number of hatchlings for linkage analysis in each of the two crosses. Hatching was induced by bathing ephippia in a solution of pure water for two hours, followed by eight minutes of bleach solution and abundant rinsing with osmotic water (Retnaningdyah and Ebert 2012;Paes et al 2016). The ephippia were then exposed to high light for 24h and then placed to standard laboratory conditions.…”