Localization of Carbonic Anhydrase in Living Osteoclasts with Bodipy 558/568-modified Acetazolamide, a Thiadiazole Carbonic Anhydrase Inhibitor

Abstract

SUMMARYWe describe the synthesis of Bodipy 558/568-modified acetazolamide, a fluorescent inhibitor of carbonic anhydrase and its use to localize the enzyme in living cells. The modified acetazolamide, with its specific sulfonamide group intact, labeled cells at concentrations as low as 10 -9 M, with a minimal loading time of 5 min. The staining was decreased by 57.4% by preincubating cells with unaltered acetazolamide (1:100) or with trifluoromethane sulfonamide, 6-ethoxyzolamide, and 5-(3-hydroxybenzoyl)-thiophene-2-sulfonamide. The efficacy of the inhibitor was unchanged by the fluorescent label, as determined by an acridine orange assay that detects acidification of osteoclasts, the cell model used in this study. This compound should prove to be useful for studying carbonic anhydrase in many organisms because of the high degree of conservation of the active site of this enzyme. (J Histochem Cytochem 47:545-550, 1999)

Engineering Tuneable Light-Harvesting Systems with Oligothiophene Donors and Mono- or Bis-Bodipy Acceptors

“…Interestingly, the combination of oligothiophenes with Bodipy as an acceptor has not been reported so far. Indeed, to the best of our knowledge, the most similar system reported to date in the literature incorporated a thiophenesulfonamide and a Bodipy-modified fluorescent inhibitor that was used for cell labeling and enzyme localization …”

Morphometric and microscopic evaluation of the effect of solution of acetazolamide as an intracanal therapeutic agent in late reimplanted rat teeth

“…The presence of acid pH in the area of resorption is fundamental for the action of most resorptive enzymes (1, 11, 12), and decrease of the pH to nearly 4.7 at the resorption lacuna is related to the presence of hydrogen ions. Formation of hydrogen ions requires hydration of carbon dioxide (1, 11, 12), a reaction that is catalyzed by the carbonic anhydrase enzyme (13, 14). Therefore, the absence or inhibition of this enzyme alters the cycle of resorption, thereby limiting resorption (12).…”

Estudo microscópico e morfométrico do efeito de substâncias anti-reabsortivas usadas como medicação intracanal em dentes de ratos avulsionados e reimplantados tardiamente

“…A presença desses íons faz com que haja a queda do pH na área, acidificando-a 22,93,105,130 . A reação química para a formação de íons hidrogênios é catalisada por uma enzima denominada anidrase carbônica 3, 35,50,81 . Esta enzima está presente no citoplasma dos clastos 35,81 Como a reabsorção por substituição caracteriza-se pela incorporação da raiz dentária na remodelação óssea, após a constituição das lacunas de reabsorção, há a formação de tecido ósseo neste local 62,133 .…”

“…A reação química para a formação de íons hidrogênios é catalisada por uma enzima denominada anidrase carbônica 3, 35,50,81 . Esta enzima está presente no citoplasma dos clastos 35,81 Como a reabsorção por substituição caracteriza-se pela incorporação da raiz dentária na remodelação óssea, após a constituição das lacunas de reabsorção, há a formação de tecido ósseo neste local 62,133 . Assim, os blastos passam a formar uma matriz conhecida como osteóide, a qual será mineralizada, até que toda a cavidade esteja preenchida por osso neoformado 69 .…”

“…A ausência de reabsorção dentária nos espécimes do grupo II pode ser justificada pelo mecanismo de ação da substância ativa da solução. A acetazolamida é conhecida como um potente inibidor da anidrase carbônica 60,90,97,128,142 , enzima presente nos clastos 3, 35,81 . Esta enzima catalisa a reação entre o gás carbônico e a água, que tem como resultado a formação de íons hidrogênios 15,22,130 , responsáveis pela queda do pH na lacuna de Howship 22,93,105,130 .…”