Karyology and molecular biology

Abstract

Il DNA mitocondriale in alcuni generi di Protozoi (Kinetopla stida) Istituto Superiore di Sanità, Laboratorio di Parassitologia.All'ordine dei Kinetoplastida appartengono Protozoi per 10 piu parassiti,caratterizzati dalla presenza di un unico mitocondrio contenente una inusuale quantita di DNA extranuclearetkDNA contenuto nel kinetoplasto).Tale DNA e stato pajr ticolarmente studiato nei generi Trypanosoma,Leishmania,e Crithidia (Stuart,K.,1983).La sua struttura presenta una organizzazione del tutto peculiare,essendo simile a quella di una ma tassa costituita da centinaia di molecole circolari di DNA,di piccole dimensioni(l-2.5 kbp) e da altre molecole circolari piu grand! di DNA(20-4o kbp) poste alia periferia della maca£ sa stessa.Questa struttura e stata studiata con metodi molec£ lari per comprenderne il significato biologico. L l uso di tecniche di ingegneria genetica ha permesso di caratterizzare e sequenziare alcuni di questi circoletti iden tificando la funzione codificante di alcuni tratti dei circo-11 grand! (maxi-circles) e particolari omologie e differenze di sequenze nei circdli piccoli (mini-circles).II kDNA ha fornito comunque un prezioso strumento di indagine, non solo dal punto di vista strettamente molecolare, ma anche come contributo ad una identificazione tassonomica di protozoi parassiti morfologicamente indistinguibili.Come esempio delle tecniche di analisi del kDNA per fini tassonomici vengono qui riportati alcuni risultati di una indaglne effettuata su stocks e ceppi di riferimento di Leishmania isolati da casi singoli di leishmaniosi viscerale e cutanea da mammiferi serbatoi della malattia.Dopo aver digerito il kDNA con endonucleasi di restrizic ne e stata osservata la migrazione elettroforetica dei frammenti ottenuti.I dati ottenuti sono stati confrontati con que! 11 ricavati dalla analisi degli isoenzimi (Gramiccia et al., 1985) e messi in relazione con alcune caratteri estrinseci del parassita,quali patologia nell'ospite,comportamento in natura e .distribuzione geografica.F. CREMISI, E. VIGNALI, F. RILJI, E. BATISTONI, F. ANDROHICO, G. BARSACCHI-PILONE DNA altsinente ripetuto: sequenae raggruppate nella eterocromatina o disperse nel genoma di Triturus Istituto di Istologia ed Embriologia, Università di Pisa II D1JA altamente ripetuto e Una componente oaratteristica dei genomi eucariotici, il cui possibile significato funzionale ed evolutivo e tuttora incerto. In Triturus -in cui i cromosomi lampbrush consentono di correlare organizzazione e funzione molecolare del genoma con.struttura e funzione cromosomica -esistono diverse famiglie di DNA altamente ripetuto. Abbiamo isolato tre di tali famiglie, caratterizzato due di esse, e, preliminarmente, la terza,dalla s.specie vulgaris meridionalis. Le tre famiglie sono denominate Hind III, Bgl II e Bam HI in base all'enzima di restrizione usato per clonarne i rispettivi monomeri.La famiglia Hind III e un tipico DNA satellite, ricco in A/T, altamente metilato, costituito da unita di ripetizione di 310 bp raggruppate in grandi blocchi entro...