Isolation of bovine lactoferrin, lactoperoxidase and enzymatically prepared lactoferricin from proteolytic digestion of bovine lactoferrin using adsorptive membrane chromatography

Plate, Kerstin; Beutel, Sascha; Buchholz, H.; Demmer, Wolfgang; Fischer-Frühholz, Stefan; Reif, Oscar‐Werner; Ulber, Roland; Scheper, Thomas

doi:10.1016/j.chroma.2006.03.090

Cited by 76 publications

(45 citation statements)

References 13 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Tradycyjne metody chromatograficzne cechuje wiele niedogodności związanych z dużymi objętościami serwatki i znaczną koncentracją w nich białek, zanieczyszczeniami, długimi cyklami oraz spadkiem ciśnienia wzdłuż kolumny chromatograficznej i skomplikowanym procesem kontrolnym [20]. Chromatografia z żywicą jonowymienną jest procesem kosztownym, co sprawia że otrzymana za jej pomocą LF o czystości 98 % osiąga przeciętną cenę 1 USD za 1 g [19].…”

Section: Separacja Laktoferyny Z Serwatki W Ekstrakcyjnych Układach Tunclassified

“…Służy temu np. adsorpcyjna chromatografia membranowa [20] oraz membranowa chromatografia powinowactwa [31]. W celu obniżenia kosztów otrzymywania LF próbowano także zastosować wstępną izolację LF z mleka za pomocą frakcjonowania z wytworzeniem piany [19].…”

Section: Separacja Laktoferyny Z Serwatki W Ekstrakcyjnych Układach Tunclassified

“…Układy trójfazowe uzyskiwano po zmieszaniu w probówce o pojemności 15 ml odpowiedniej objętości serwatki wysyconej siarczanem amonu (20,40 lub 60 %, m/v) z tert-butanolem. Stosunek objętości serwatki do tert-butanolu wynosił 1 : 0,5; 1 : 1 lub 1 : 2.…”

Section: Materiał I Metody Badańunclassified

“…W związku z tym próbowano oczyszczać laktoferynę za pomocą technik łączą-cych zasady separacji filtracji membranowej z innymi metodami rozdziału substancji, np. przez zastosowanie adsorpcyjnej chromatografii membranowej, które pozwoliło na osiągnięcie wydajności odzysku laktoferyny powyżej 90 % [20]. Wykorzystanie membranowej chromatografii powinowactwa umożliwiło z kolei uzyskanie preparatów laktoferyny o czystości równej 94 % [31].…”

Section: Wyniki I Dyskusjaunclassified

“…metale przejściowe (miedź) i różnego rodzaju związki chemiczne o charakterze anionów, takie jak: heparyna, cząsteczki DNA oraz specyficzne przeciwciała. Dotychczas wymienione metody stosowano jedynie w skali laboratoryjnej, podobnie jak filtrację żelową i chromatografię oddziaływań hydrofobowych [13,29].Tradycyjne metody chromatograficzne cechuje wiele niedogodności związanych z dużymi objętościami serwatki i znaczną koncentracją w nich białek, zanieczyszczeniami, długimi cyklami oraz spadkiem ciśnienia wzdłuż kolumny chromatograficznej i skomplikowanym procesem kontrolnym [20]. Chromatografia z żywicą jonowymienną jest procesem kosztownym, co sprawia że otrzymana za jej pomocą LF o czystości 98 % osiąga przeciętną cenę 1 USD za 1 g [19].…”

unclassified

See 4 more Smart Citations

Separation of Lactoferrin From Whey in Three-Phase Extraction Systems (Tpp Method)

Demczyński¹,

Dolata²,

Bombczyńska³

et al. 2013

ZNTJ

View full text Add to dashboard Cite

SEPARACJA LAKTOFERYNY Z SERWATKI W EKSTRAKCYJNYCH UKŁADACH TRÓJFAZOWYCHS t r e s z c z e n i e Do separacji laktoferyny z serwatki zastosowano ekstrakcję w układach trójfazowych. W pracy zbadano 72 warianty układów trójfazowych, które różniły się stopniem wysycenia serwatki siarczanem amonu, pH oraz objętościowym stosunkiem serwatki do tert-butanolu. W powstałych fazach oznaczono stężenie laktoferyny i zawartość białka ogólnego w celu wyznaczenia parametrów separacji, takich jak: stopień oczyszczenia oraz wydajność odzysku laktoferyny. Na podstawie uzyskanych doświadczalnie parametrów separacji opracowano model matematyczny. Ustalony na jego podstawie optymalny układ trójfazowy składał się z serwatki o pH 10 wysyconej w 35 % siarczanem amonu, natomiast objętościowy stosunek serwatki do tert-butanolu wynosił 1 : 0,5. Takie warunki ekstrakcji umożliwiały uzyskanie w fazie dolnej układu trójfazowego preparatu laktoferyny o stopniu oczyszczenia wynoszącym około 3. Wydajność ekstrakcji laktoferyny w tej fazie była równa 26 %.Słowa kluczowe: układ trójfazowy, laktoferyna, serwatka, tert-butanol, ekstrakcja Wprowadzenie Laktoferyna (LF) jest jednym z białek o właściwościach bioaktywnych wchodzą-cych w skład białek serwatkowych. Jej stężenie w serwatce mleka wynosi od 50 do 120 mg/dm 3 [12,14,27]. Białko to występuje również w wydzielinach innych niż mleko, takich jak: łzy, pot, ślina, a także w wielu narządach, błonach surowiczych oraz w drugorzędowych ziarnistościach granulocytów obojętnochłonnych u ssaków [1,15]. Laktoferyna należy do grupy transferyn i jest glikoproteiną o budowie monomerycznej, której łańcuch polipeptydowy o masie 80 000 Da składa się z dwóch kulistych płatów połączonych regionem zawiasowym [22]. Funkcje laktoferyny związane są z mechanizmami naturalnej odporności organizmu. Wykazuje ona właściwości bakteriostatycz- [15,23]. Laktoferyna jest przeciwutleniaczem, ma aktywność prokoagulanta nowotworowego, rybonukleazy, proteazy, a in vitro wykazuje działanie czynnika aktywującego transkrypcję kilku genów [16,29].Laktoferyna (bLF) jest izolowana na skalę przemysłową od 1985 r. głównie z mleka i z serwatki. Szacuje się, że jej roczna światowa produkcja wynosi 60 -79 t. Białko to znajduje zastosowanie w kosmetyce, produkcji preparatów odżywczych dla niemowląt oraz jako suplement produktów mlecznych (np. chudego mleka, jogurtów). Preparaty laktoferyny mają także formę tabletek [28,29].Ze względu na denaturację laktoferyny surowce do jej produkcji nie mogą być poddawane pasteryzacji. Najczęstszym sposobem otrzymywania preparatów zawierających bLF przez firmy produkujące suplementy jest wykorzystanie chromatografii kationowymiennej [29]. Izolacja laktoferyny od innych białek jest możliwa, gdyż dwa główne białka serwatki (-laktoalbumina i β-laktoglobulina) mają inne punkty izoelektryczne (pI). Zastosowanie odpowiedniego pH powoduje, że laktoferynę można zwią-zać na wymieniaczu jonowym, a następnie eluować jako osobną frakcję z powierzchni wymieniacza przy użyciu roztworu soli o odpowiednim stężeniu [18].W ...

show abstract

Section: Separacja Laktoferyny Z Serwatki W Ekstrakcyjnych Układach Tunclassified

Section: Materiał I Metody Badańunclassified

Section: Wyniki I Dyskusjaunclassified

unclassified

See 3 more Smart Citations

Separation of Lactoferrin From Whey in Three-Phase Extraction Systems (Tpp Method)

Demczyński¹,

Dolata²,

Bombczyńska³

et al. 2013

ZNTJ

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

Membrane Chromatography

Pieracci

Thömmes

2010

Encyclopedia of Industrial Biotechnology

View full text Add to dashboard Cite

It has been nearly 20 years since membrane chromatography was first introduced as a technology capable of purifying proteins. In that time, a large body of work has been generated which has described the fundamental transport mechanisms behind membrane adsorption, the advantages that membrane adsorbers possess as compared to column chromatography, the various membrane surface chemistries that can be created, and the application of membrane chromatography in the purification of a wide variety of proteins. In this review, the basic concept of membrane chromatography is explained, which includes a discussion of the factors that control membrane performance and how that performance can be optimized. The diverse ligand chemistries that have been used to create the three main families of membrane adsorbers that is affinity, hydrophobic interaction, and ion exchange, are described along with available membrane adsorber formats. Finally, applications of membrane adsorbers throughout a standard protein purification train, from the direct capture of proteins from unclarified feedstocks to the clearance of trace impurities in final polishing steps, will be demonstrated using small‐ and pilot‐scale examples.

show abstract

Modern Chromatographic Separation Technologies for Isolation of Dairy Ingredients

Woonton

Kulozik

Silva³

et al. 2013

Advances in Dairy Ingredients

View full text Add to dashboard Cite

Isolation of bovine lactoferrin, lactoperoxidase and enzymatically prepared lactoferricin from proteolytic digestion of bovine lactoferrin using adsorptive membrane chromatography

Cited by 76 publications

References 13 publications

Separation of Lactoferrin From Whey in Three-Phase Extraction Systems (Tpp Method)

Separation of Lactoferrin From Whey in Three-Phase Extraction Systems (Tpp Method)

Membrane Chromatography

Modern Chromatographic Separation Technologies for Isolation of Dairy Ingredients

Contact Info

Product

Resources

About