Influência do estrógeno, progesterona e testosterona nos níveis de expressão e na distribuição de ADAMTS-1 (uma desintegrina e metaloproteinase com domínios trombospondinas 1) em células mamárias humanas normais e tumorais.

Abstract

Gostaria de agradecer à Profa. Dra. Vanessa Morais Freitas, por todo apoio e orientação. Muito obrigada pela oportunidade, pela confiança, ensinamentos e pela SUPER PACIÊNCIA (que não foi pouca). Serei eternamente grata por você ter me recebido de braços abertos e aceito realizar este projeto comigo. Admiro muito sua inteligência e sua liderança. Sua postura profissional é um exemplo para mim. Muito obrigada! Agradeço ao Prof. Dr. Ruy Gastaldoni Jaeger, pela colaboração neste estudo, e por todas as sugestões feitas durante o processo de escrita do meu artigo, especialmente na formatação das figuras. Obrigada pela permissão em utilizar os equipamentos e reagentes do seu laboratório. O câncer de mama é segundo tipo de neoplasia mais frequente no mundo, e no Brasil é o segundo maior causador de morte entre as mulheres. Os hormônios sexuais estão dentre os vários fatores indutores ou promotores da carcinogênese. O microambiente tumoral está ligado ao desenvolvimento e a progressão do câncer. Ele é composto por fibroblastos, células inflamatórias, fatores de crescimento, proteínas, glicosaminoglicanos, proteoglicanos e proteases que remodelam a MEC. ADAMTS (uma desintegrina e metaloproteinase com domínios trombospondinas) é uma enzima dependente de Zn 2+ /Ca 2+ . Na literatura o papel da ADAMTS-1 no câncer não está claramente estabelecido, tanto sua alta expressão, quanto sua baixa expressão foram reportados em tumores, quando comparados ao tecido normal. Neste trabalho avaliamos a influência dos hormônios sexuais nos níveis de expressão e na localização da protease ADAMTS-1 em três linhagens celulares de mama. O qPCR demonstrou que a progesterona estimulou o aumento da expressão de mRNA de ADAMTS-1 nas células MCF-10A e nas células MDA-MB-231, o tratamento com estrógeno e progesterona estimulou a diminuição dos níveis desse mRNA. No Western blot, observamos nas linhagens MCF-10A e MCF-7 que os hormônios tendem a aumentar os níveis proteicos de ADAMTS-1, e que o estrógeno estimulou uma acentuada secreção de ADAMTS-1 na linhagem MCF-7. Na linhagem MDA-MB-231, os tratamentos com os hormônios demonstraram uma tendência a diminuir os níveis proteicos de ADAMTS-1 intracelular. Na imunofluorescência e no Western blot que analisou frações citoplasmáticas e nucleares, observamos a predominância de ADAMTS-1 no compartimento nuclear. Nossos resultados sugerem que 1) os hormônios regulam a expressão de ADAMTS-1 nas células normais e tumorais de mama e que esse efeito foi relacionado com a presença dos receptores para esses hormônios e 2) ADAMTS-1 está predominantemente presente no núcleo dessas células mamárias. Breast cancer is the second most common type of neoplasia in the world, and the second largest cause of death among women in Brazil. Sex hormones are one of the several cancer inducers or promoters. Tumor microenvironment is associated to development and cancer progression. It is composed by fibroblasts, inflammatory cells, growth factors, proteins, proteoglycans and remodeling ECM proteases. ADAMTS (a disintegrin and m...

Atividade antiproliferativa e ação estrogênica/antiestrogênica de extratos e frações de algumas espécies de "Mentha" (Lamiaceae)

“…Possuem receptores de estrógeno no citoplasma celular e, desta forma, são capazes de processá-lo na forma de estradiol. Além disso, apesar de ser uma linhagem tumoral conserva características particulares do epitélio mamário (Silva, 2014). As células MCF7 BUS superexpressam receptores de estradiol e são derivadas de uma efusão pleural de paciente com carcinoma mamário mestastático, previamente tratado com radioterapia e terapia hormonal (Grünfeld and Bonefeld-Jorgensen, 2004).…”

“…As células MCF7 BUS superexpressam receptores de estradiol e são derivadas de uma efusão pleural de paciente com carcinoma mamário mestastático, previamente tratado com radioterapia e terapia hormonal (Grünfeld and Bonefeld-Jorgensen, 2004). A linhagem MCF 10A é constituída por células epiteliais mamárias humanas, imortalizadas e não transformadas, definidas como células normais de mama que exibem numerosas características de epitélio mamário normal, incluindo positividade para receptores de estrógeno, progesterona e andrógeno (Silva, 2014). Já as células da linhagem MDA-MB-231 são do tipo carcinoma mamário, com alto grau de invasividade e poder metastático, classificadas como do subtipo molecular triplo negativo, uma vez que não expressam receptores de estrógeno, progesterona e HER2.…”

“…É primariamente formado nas células granulosas dos ovários, enquanto as formas estrona e estriol são convertidas a partir dele, por ação da enzima aromatase, no fígado (Gao et al, 2016). Concomitante à sua atividade fisiológica, o estrógeno desempenha uma função importante no desenvolvimento e progressão do câncer de mama hormônio-dependente, desencadeando um aumento na proliferação destas células (Silva, 2014).…”

“…Recebe este nome porque não expressa ER, PR e nem receptor de fator de crescimento epidermal 2 (HER-2). Este tipo de câncer exibe um comportamento clínico mais agressivo e com maior potencial metastático do que o subtipo hormônio-dependente (Rodrigues, 2013;Silva, 2014). O fenótipo triplo-negativo não é passível de nenhuma forma de terapia endócrina e não existem relatos na literatura de algum tipo de tratamento específico.…”