Increased content of CD34+CD38− hematopoietic stem cells in the last collected umbilical cord blood

Malangone, W.; Belvedere, Ornella; Astori, Giuseppe; Adami, Valentina; Donini, Annibale; Falasca, E; Sala, Pierguido; Frate, G. Del; Pittino, Marco; Anna, D. De; Degrassi, A.

doi:10.1016/s0041-1345(00)02672-5

Cited by 4 publications

(4 citation statements)

References 7 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…There is evidence that cord blood, bone marrow and peripheral blood-derived HSCs are highly heterogeneous for a number of antigens useful for HSC enumeration by flow cytometry (6). HLA-DR is expressed in the majority of HUCB (4,13) and peripheral blood (13,19) CD34 + cells. While De Bruyn et al (21) showed that the co-expression of CD34 with HLA-DR was not significantly different in HUCB and bone marrow (86.3 ± 2.7 and 92.7 ± 5.1%, respectively), Cho et al (22) showed that CD34 + HLA-DR + cell frequencies did not differ significantly between those two compartments and MNCs.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

“…The CD34 + protein is a surface glycoprotein expressed on HSCs and progenitor cells in early developmental stages in HUCB and bone marrow, as well as on endothelial cells. The CD34 + CD38 -immunophenotype defines a primitive subpopulation of progenitor cells in fetal liver and fetal or adult bone marrow (3)(4)(5). About 1% of bone marrow cells express CD34, and generally less than 1% of these cells are CD38-negative.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

See 1 more Smart Citation

Immunophenotype of hematopoietic stem cells from placental/umbilical cord blood after culture

Pranke

Hendrikx

Debnath

et al. 2005

Braz J Med Biol Res

View full text Add to dashboard Cite

Identification and enumeration of human hematopoietic stem cells remain problematic, since in vitro and in vivo stem cell assays have different outcomes. We determined if the altered expression of adhesion molecules during stem cell expansion could be a reason for the discrepancy. CD34+CD38- and CD34+CD38+ cells from umbilical cord blood were analyzed before and after culture with thrombopoietin (TPO), FLT-3 ligand (FL) and kit ligand (KL; or stem cell factor) in different combinations: TPO + FL + KL, TPO + FL and TPO, at concentrations of 50 ng/mL each. Cells were immunophenotyped by four-color fluorescence using antibodies against CD11c, CD31, CD49e, CD61, CD62L, CD117, and HLA-DR. Low-density cord blood contained 1.4 ± 0.9% CD34+ cells, 2.6 ± 2.1% of which were CD38-negative. CD34+ cells were isolated using immuno-magnetic beads and cultured for up to 7 days. The TPO + FL + KL combination presented the best condition for maintenance of stem cells. The total cell number increased 4.3 ± 1.8-fold, but the number of viable CD34+ cells decreased by 46 ± 25%. On the other hand, the fraction of CD34+CD38- cells became 52.0 ± 29% of all CD34+ cells. The absolute number of CD34+CD38- cells was expanded on average 15 ± 12-fold when CD34+ cells were cultured with TPO + FL + KL for 7 days. The expression of CD62L, HLA-DR and CD117 was modulated after culture, particularly with TPO + FL + KL, explaining differences between the adhesion and engraftment of primary and cultured candidate stem cells. We conclude that culture of CD34+ cells with TPO + FL + KL results in a significant increase in the number of candidate stem cells with the CD34+CD38- phenotype

show abstract

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Immunophenotype of hematopoietic stem cells from placental/umbilical cord blood after culture

Pranke

Hendrikx

Debnath

et al. 2005

Braz J Med Biol Res

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Η βιωσιμότητα των καλλιεργειών ήταν 96 ± 3.6%, όπως καθορίστηκε μετά από χρώση με 7-ΑΑD (Διάγραμμα 7) (n=67). (32). Έχει προταθεί ότι ο ελάχιστος αριθμός εμπύρηνων κυττάρων, προκειμένου να μειωθεί ο χρόνος της ανάκτησης του αιμοποιητικού συστήματος μετά από μεταμόσχευση ότι πρέπει να είναι 1,5 Χ10 7 (46) ή 2 Χ10 7 ανά κιλό βάρους σώματος του ασθενούς (47).…”

Section: κυτταρομετρία ροήςunclassified

“…Ο αριθμός των CD 34 αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων είναι επίσης πολύ σημαντικός, καθώς υπάρχει συσχέτιση του αριθμού αυτού με τον αριθμό των συνολικών εμπύρηνων κυττάρων(48). Έρευνες οι οποίες έχουν διεξαχθεί σε μια προσπάθεια να προσδιοριστεί ο ακριβής αριθμός κυττάρων που απαιτείται έδειξε ότι σημαντικοί παράγοντες εκτός του αριθμού των κυττάρων παίζουν σημαντικό ρόλο για την επιτυχή έκβαση μιας μεταμόσχευσης, όπως ο δότης, το αυτόλογο ή ετερόλογο μόσχευμα, ο αριθμός των ταυτόσημων HLA αλληλίων καθώς και το είδος της ασθένειας του δέκτη(49) (32)…”

unclassified

Διαχωρισμός Και Ταυτοποίηση Πολυδύναμων Κυτταρικών Σειρών Από Την Ομφαλιοπλακουντιακή Μονάδα

Tsagias¹,

Τσάγιας²

View full text Add to dashboard Cite

Ο ομφάλιος λώρος αποτελεί σημαντική πηγή βλαστοκυττάρων, για τη θεραπεία αιματολογικών και μη αιματολογικών ασθενειών. Παγκοσμίως πραγματοποιούνται χιλιάδες μεταμοσχεύσεις με τη χρήση βλαστοκυττάρων από την ομφαλοπλακουντιακή μονάδα, ενώ παρατηρείται ραγδαία αύξηση των κλινικών μελετών για την εφαρμογή τους σε μεγαλύτερο αριθμό ασθενειών. Στην παρούσα διατριβή μελετήθηκαν όλοι οι παράγοντες που θα οδηγήσουν στην ανάκτηση και απομόνωση μεγάλου αριθμού βλαστοκυττάρων από την ομφαλοπλακουντιακή μονάδα αλλά και η ύπαρξη πολυδύναμων βλαστικών κυττάρων με ικανότητα διαφοροποίησης σε άλλους κυτταρικούς πληθυσμούς.Η χρήση των ομφαλοπλακουντιακών μονάδων έναντι άλλων πηγών μεταμοσχεύσεων πλεονεκτεί καθώς τα κύτταρα αυτά είναι πιο νεανικά βλαστικά κύτταρα του οργανισμού και επιπλέον πιο ανώριμα ανοσολογικά. Βασικό μειονέκτημα αποτελεί ο μικρός αριθμός βλαστικών κυττάρων που απομονώνονται από κάθε ομφαλοπλακουντιακή μονάδα. Βασικός στόχος της μελέτης ήταν η απομόνωση μεγαλύτερου αριθμού βλαστοκυττάρων τόσο με τις καθιερωμένες μεθόδους λήψης όσο και με νέες μεθόδους. Μελετήθηκαν οι παράγοντες και οι συνθήκες στις οποίες πρέπει το ομφαλοπλακουντιακό αίμα να μεταφέρεται μέχρι την επεξεργασία. Διαπιστώθηκε ότι διατήρηση στους 40C αλλά και η άμεση επεξεργασία για την απομόνωση ομφαλοπλακουντιακών μοσχευμάτων αποτελούν σημαντικούς παράγοντες της ανάκτησης του μεγαλύτερου αριθμού βλαστοκυττάρων. Εφαρμόστηκε διαδικασία επεξεργασίας των βλαστοκυττάρων από το ομφαλοπλακουντιακό αίμα που οδηγεί σε ποσοστά ανάκτησης βλαστοκυττάρων μικρού τελικού όγκου και υψηλής απομάκρυνσης των ερυθρών αιμοσφαιρίων χρησιμοποιώντας υλικά κατάλληλα για κλινικές μελέτες. Παράλληλα εφαρμόστηκε πρωτοποριακή μέθοδος απομόνωσης βλαστοκυττάρων από το εσωτερικό του πλακούντα. Έγινε αποστράγγιση του αίματος του πλακούντα που οδηγεί σε μεγαλύτερο αριθμό αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων αλλά και πολυδύναμων κυττάρων ικανών για διαφοροποίηση σε άλλες κυτταρικές σειρές. Με τη νέα τεχνική λαμβάνονται τουλάχιστον δυο διαφορετικοί πληθυσμοί βλαστικών κυττάρων. Ένας CD34+, CD45+αιμοποιηιτικός πληθυσμός με δυνατότητες δημιουργίας όλων των αιμοποιητικών σειρών και ένας CD34-, CD45- πληθυσμός που εκφράζει μεσεγχυματικούς δείκτες, όπως CD90, CD105, CD29, CD44, και δυνατότητα διαφοροποίησης προς άλλους ιστούς του μεσοδέρματος. Η νέα ποσότητα ομφαλοπλακουντιακού αίματος που λαμβάνεται είναι εμβρυϊκής προέλευσης καθώς δε διαπιστώθηκε επιμόλυνση από μητρικό αίμα. Παράλληλα απομονώθηκαν πολυδύναμα βλαστοκύτταρα από τον ομφάλιο λώρο με τη προσθήκη βλαστικών κυττάρων από το λιπώδη ιστό. Τα κύτταρα που απομονώθηκαν μελετήθηκαν με τη βοήθεια κυτταρομετρίας ροής και ήταν θετικά σε δείκτες που εκφράζουν τα πολυδύναμα βλαστοκύτταρα (USSCs). Απομονώθηκαν βλαστοκύτταρα από τη γέλη του Wharton και εφαρμόστηκε μια νέα τεχνική απομόνωσης μεσεγχυματικών βλαστικών κυττάρων από ολόκληρο το μήκος του ομφαλίου λώρου. Με τη νέα τεχνική απομονώνονται περισσότερα μεσεγχυματικά κύτταρα από τον ιστό του ομφάλιου λώρου. Κύτταρα που απομονώθηκαν διαφοροποιήθηκαν σε οστικά κύτταρα και λιποκύτταρα. Τα βλαστικά κύτταρα διατήρησαν τα χαρακτηριστικά τους κατά τη διάρκεια των ανακαλλιεργειών και μετά την απόψυξη. Κύτταρα που απομονώθηκαν από ολόκληρο το μήκος του ομφαλίου λώρου ελέχθησαν για την ύπαρξη πολυδύναμων εμβρυϊκών δεικτών. Διαπιστώθηκε η παρουσία μικρών σε μέγεθος κυττάρων στον ιστό του ομφαλίου λώρου που παρουσιάζουν μορφολογικά και φαινοτυπικά χαρακτηριστικά παρόμοια με αυτά των εμβρυϊκών κυττάρων (VSELs). Τα κύτταρα που απομονώθηκαν ήταν θετικά για τους εμβρυϊκούς δείκτες Oct CXCR4 και Nanog ενώ χρωματίζονται έντονα με την αλκαλική φωσφατάση, χρωστική που χαρακτηρίζει και τα εμβρυϊκά πολυδύναμα κύτταρα. Συνοψίζοντας μπορούμε να πούμε ότι τα αποτελέσματα της παρούσας διατριβής ενισχύουν τη σημασία των ομφαλοπλακουντιακών μονάδων στο πεδίο των μεταμοσχεύσεων αλλά και στις εφαρμογές της αναγεννητικής ιατρικής. Νέες μέθοδοι απομόνωσης αλλά και νέες πηγές αιμοποιητικών, μεσεγχυματικών και πολυδύναμων βλαστικών κυττάρων προτείνονται οι οποίες θα αυξήσουν τη χρήση των ομφαλοπλακουντιακών μονάδων για θεραπευτικές εφαρμογές.

show abstract

Stem Cells from Umbilical Cord Blood

Pranke

Canabarro²

2008

Frontiers of Cord Blood Science

View full text Add to dashboard Cite

Increased content of CD34+CD38− hematopoietic stem cells in the last collected umbilical cord blood

Cited by 4 publications

References 7 publications

Immunophenotype of hematopoietic stem cells from placental/umbilical cord blood after culture

Immunophenotype of hematopoietic stem cells from placental/umbilical cord blood after culture

Διαχωρισμός Και Ταυτοποίηση Πολυδύναμων Κυτταρικών Σειρών Από Την Ομφαλιοπλακουντιακή Μονάδα

Stem Cells from Umbilical Cord Blood

Contact Info

Product

Resources

About