In Vivo Impairment of Neutrophil Recruitment during Lentivirus Infection

Abstract

Evidence indicates that the lentivirus, HIV, infection affects neutrophil response to bacteria and bacterial products in vitro. We used a novel model of rapid onset immunosuppression following infection with a similar lentivirus, feline immunodeficiency virus (FIV), in cats to examine neutrophil function within the microvasculature in vivo and to determine the steps that are impaired in the neutrophil recruitment cascade. In uninfected cats and cats infected neonatally with FIV, the mesentery was exteriorized, but remained autoperfused during intravital microscopy for 4 h. When the tissue was superfused with 10 μg/ml of LPS for 4 h, intravital microscopy displayed a profound increase in neutrophil rolling at both 8 and 12 wk of age in uninfected cats. At 12 wk of age, FIV-infected animals showed a profound decrease in the number of rolling neutrophils. In vitro studies revealed that neutrophils from infected and uninfected animals rolled equally well on surrogate selectin substrata. In addition, in vivo neutrophil adhesion and emigration out of the vasculature were severely reduced, and in vitro neutrophil chemotaxis from FIV-infected animals was significantly impaired in response to fMLP or IL-8. However, FIV infection of neutrophils could not be detected. In summary, in vivo lentivirus infection with immunosuppression leads to a severe impairment in neutrophil rolling, adhesion, and emigration in response to bacterial stimulants potentially involving both endothelial and neutrophil dysfunction. These in vivo studies also indicate that neutrophil dysfunction should be taken into account when treating infections and tissue injury.

In Vivo Observation of Mesenteric Leukocyte-Endothelial Interactions After Cecal Ligation/Puncture and Surgical Sepsis Source Control

“…[13][14][15] Adherent cells were counted during a 10 minute-period in a 100 µm segment of the vessel, with 3 to 5 microvessels being selected from each animal.…”

The Effects of Low and High Tidal Volume and Pentoxifylline on Intestinal Blood Flow and Leukocyte-Endothelial Interactions in Mechanically Ventilated Rats

“…We counted the number of rolling leukocytes as the number of white cells that passed a designated line perpendicular to the venular axis during a 10-min period. [24][25][26]28 We counted the number of adherent cells as the number of cells that remained stationary for Ͼ 30 seconds on a 100-m segment of the venular endothelium during a 10-min period. [24][25][26]28 We counted the number of migrated leukocytes as the number of cells accumulated at the connective tissue, adjacent to the chosen postcapillary venule, in a standard area of 5,000 m. [24][25][26] …”

Efeitos da ventilação mecânica e pressão positiva no final da expiração sobre a microcirculação mesentérica em ratos Wistar

“…Entretanto, uma hiperativação e acúmulo leucocitário no tecido estão, geralmente, associados a uma maior liberação de citocinas inflamatórias, resultando em resposta imune pró-inflamatória exacerbada que, por sua vez, pode contribuir para uma lesão microvascular difusa e subseqüente destruição endotelial. 20,28 A microscopia intravital é uma técnica de observação in vivo da microcirculação, isto é, permite a observação em tempo real do fluxo sanguíneo em microvasos (arteríolas e vênulas com diâmetro menor que 100 µm), mudanças na permeabilidade vascular, e também permite a avaliação do comportamento leucocitário: rolamento, adesão ao endotélio e migração de leucócitos para o tecido perivascular diante de um processo inflamatório. 28 …”

“…20,28 A microscopia intravital é uma técnica de observação in vivo da microcirculação, isto é, permite a observação em tempo real do fluxo sanguíneo em microvasos (arteríolas e vênulas com diâmetro menor que 100 µm), mudanças na permeabilidade vascular, e também permite a avaliação do comportamento leucocitário: rolamento, adesão ao endotélio e migração de leucócitos para o tecido perivascular diante de um processo inflamatório. 28 …”

“…28 Determinamos o número de leucócitos aderidos durante 10 minutos em uma extensão de 100 µm de vênula. O resultado final de leucócitos aderidos foi expresso em média do número de leucócitos ± DP/100 µm de comprimento de vênula.…”