In Vitro Production of Embryos at Research and Development Station for Cattle Breeding Dancu, Iasi – First Bovine Embryos Produced In Vitro in North-Eastern Romania

Abstract

ABSTRACT. The in vitro production (IVP) of bovine embryos increases the selection intensity in cattle and reduces the generation interval, which is very important in the genetic gain. In Romania, this reproductive biotechnology has shown a timid evolution in the last years, although the need for genetic improvement in the area is present. The aim of this paper is to describe the work that resulted in first bovine embryos obtained through IVP in North-Eastern Romania. Oocytes were collected by slashing ovaries from slaughtered cows, matured in a TCM199-based medium and fertilized in TL-based medium microdrops with sperm processed by swim-up procedure. The presumptive embryos were cultured one day in TCM199 and 8 days in SOF-based medium and evaluated in days 7, 8 and 9 after fertilization. We retrieved an average number of 83 usable oocytes/IVF session, which represents 73.8% from the total harvested oocytes. The average number of cleaved embryos was 50.8 per IVF, reflecting an average cleavage rate of 61.2%. An average of 8.6 blastocysts/IVF session was obtained, representing 10.4% of the selected oocytes or 16.9% of the number of cleaved embryos. Although suboptimal, the results were comparable with other reports on IVP in cattle. The adapted IVP protocol, based on maturation with TCM199, fertilization in microdrops of TL and culture of presumptive embryos one day in TCM199 and afterwards in SOF seems to offer acceptable results and will be used for further attempts to produce bovine embryos.Keywords: IVP; TCM199 medium; TL medium; SOF medium; swim-up. REZUMAT. Producerea in vitro S.I. BORŞ ET AL.110 creștere a intensității de selecție a bovinelor și o reducere a intervalului între generații, elemente importante în realizarea câștigului genetic. În România, această biotehnică de reproducere asistată la taurine a prezentat o evoluție timidă în ultimii ani, deși există o nevoie crescută în ceea ce privește ameliorarea șeptelului de bovine pentru lapte. Scopul acestui studiu este de a descrie rezultatele obținute ca urmare a cercetărilor efectuate pentru producerea primilor embrioni in vitro la specia Bos taurus în zona de Nord-Est a României. Ovocitele au fost recoltate prin realizarea unor incizii multiple în corticala ovarelor provenite de la vaci sacrificate în abator, apoi maturate în mediul TCM 199 și fertilizate în mediul TL, cu material seminal procesat prin metoda swim-up. Embrionii au fost apoi cultivați o zi în mediul TCM 199 și 8 zile în mediul SOF, evaluarea lor făcându-se pe parcurs în zilele 7, 8 și 9 după fertilizare. S-a obținut o medie de 83 ovocite de bună calitate recoltate/sesiune fertilizare in vitro (FIV), ceea ce reprezintă 73,8% din totalul ovocitelor recoltate. Numărul mediu de embrioni divizați a fost de 50,8/sesiune FIV, ceea ce reflectă o rată de clivaj de aproximativ 61,2%. Din totalul acestora s-a obținut un număr mediu de 8,6 blastociști/sesiune FIV, reprezentând 10,4% din totalul ovocitelor selectate sau 16,9% din numărul de embrioni clivați. Deși rezultatele nu sunt optime, pot f...