In vitro penetration of fresh and vitrified swine oocytes by homologous spermatozoa using different incubation systems

Concentração de lactato de cálcio e tempo de incubação sobre a capacidade de adesão e penetração de espermatozoides suínos na membrana perivitelina do ovo da galinha

“…O número de espermatozoides aderidos na MP externa e o número de orifícios na MP interna foram maiores com incubação por 20min (Tabela 2), em um meio já utilizado anteriormente para a realização de teste de penetração in vitro da espécie suína (MACEDO et al, 2006;. Esse período de incubação é condizente com os achados de FUNAHASHI & ROMAR (2004), que não observaram diferença na taxa de penetração in vitro, com co-incubação de gametas suínos no intervalo de 5 a 30min, sem agentes capacitantes.…”

“…Portanto, machos subférteis podem, eventualmente, ser utilizados na rotina de programas de inseminação artificial (IA). Além disso, estas avaliações apresentam baixa associação com a fertilidade e são sensíveis a variações de características individuais atribuídas aos machos doadores de sêmen (XU et al, 1998;POPWELL & FLOWERS, 2004;MACEDO et al, 2006). Portanto, existe a necessidade de desenvolvimento de métodos in vitro eficientes no diagnóstico do potencial de fertilização dos espermatozoides suínos.…”

“…Entre os testes que podem ser utilizadas para predizer a fertilidade de machos suínos, podem ser citados: o teste de penetração espermática in vitro em ovócitos homólogos (LARSSON & RODRÍGUES-MARTÍNEZ, 2000;POPWELL & FLOWERS, 2004;MACEDO et al, 2006;e o teste de fertilização in vitro (PELÁEZ et al, 2006). Entretanto, esses testes são relativamente trabalhosos e onerosos, inviabilizando a sua utilização na rotina de centrais de IA, o que justifica o desenvolvimento de outros métodos de avaliação in vitro.…”

“…O lactato de cálcio é capaz de estimular a capacitação espermática e/ou a reação acrossomal em espermatozoides suínos (ABEYDEERA & DAY, 1997). Além disso, há uma grande variação no tempo de coincubação dos gametas, mesmo que a maioria dos protocolos utilize co-incubação por 6h (ABEYDEERA & DAY, 1997;MACEDO et al, 2006). Entretanto, GIL et al (2004) observaram que, com períodos de coincubação entre 10 e 30min, ocorre um aumento no número de espermatozoides por ovócito penetrado.…”

Pre-selection by double layer density gradient centrifugation improves the fertilising capacity of frozen–thawed, capacitated stallion sperm

“…In horses, conventional methods of semen quality evaluation, such as sperm motility, morphology, viability and concentration, are routinely used to rapidly estimate reproductive potential, but the results obtained do not correlate well with the final fertility rates achieved (Amann and Hammerstedt, 2002;Kuisma et al, 2006;Love, 2011;Rodríguez-Martínez, 2003). A better alternative is to examine the capacity of spermatozoa to penetrate homologous or heterologous oocytes in vitro (Cox et al, 1994;García-Álvarez et al, 2009;Macedo et al, 2006Macedo et al, , 2010Slavík and Fulka, 1992;Zhao et al, 2002). This has provided excellent results in donkeys (Taberner et al, 2010).…”