In vitro interaction of polymeric biomaterials with cells

Desarrollo de un composito para reparación y regeneración de nervio periférico

“…Entre los ensayos empleados para evaluar la viabilidad celular, se encuentra la tinción de azul de tripano y el ensayo live/dead, para determinar la sobrevivencia de las células en un sustrato. Estos ensayos se basan en la integridad de la membrana citoplasmática para determinar la viabilidad de la célula (Sousa et al, 2017).…”

“…El azul de tripano penetra la membrana de células afectadas, permitiendo discriminarlas de células con membranas intactas y poder realizar un ensayo de exclusión. Esta prueba permite además realizar una cuantificación de las células en un hematocitómetro, sin embargo, existe la limitante de requerir las células en suspensión para poder efectuar el conteo, lo cual implicaría despegar las células del andamio, proporcionando mayores complicaciones al ensayo (Sousa et al, 2017).…”

“…La tinción de las células cultivadas en un andamio tridimensional podría dar una idea de la cantidad de células inviables, siendo la detección de células viables más complicada, dada la estructura opaca del material. Además, mediante esta técnica se obtiene una imagen en dos dimensiones de la muestra, perdiéndose la componente volumétrica al tratarse de andamios (Sousa et al, 2017).…”

“…El homodímero de etidio y el yoduro de propidio son impermeables a la membrana que se enlazan al ADN, empleados para detectar células muertas o cuya membrana está dañada, ya que son excluidos por las células con la membrana intacta. Este ensayo permite obtener la cantidad de células viables e inviables, ya sea por métodos cualitativos en el microscopio confocal o cuantitativos, en el citómetro de flujo, en cuyo caso se deben despegar las células del andamio (Sousa et al, 2017).…”

“…Solventes orgánicos como el dimetil sulfóxido (DMSO) y/o detergentes como el SDS se emplean para solubilizar el precipitado de formazan, y así poder medir la absorbancia de la solución mediante un espectrofotómetro o un lector de microplacas. Dado que las células inviables o muertas son incapaces de reducir el MTT, la absorbancia obtenida es proporcional al número de células viables (Sousa et al, 2017).…”