In vitro and in vivo maturation of llama oocytes

Ratto, M.H.; Berland, M.; Huanca, L Wilfredo; Singh, Jaswant; Adams, Gregg P.

doi:10.1016/j.theriogenology.2004.09.053

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“…Se dispone de un estudio en llamas donde se obtuvo 30.4% de maduración (ovocitos en Metafase II) después de 30 horas de cultivo (Del Campo et al, 1994), pero el objetivo no fue la determinación del tiempo de maduración, sino que estuvo orientado a demostrar la factibilidad de desarrollar un protocolo de fecundación in vitro en camélidos, así como determinar la capacidad fecundante de espermatozoides obtenidos de epidídimos, que sirvan como base para el desarrollo de protocolos de FIV. En otro estudio se obtuvo 78% de ovocitos en estadio de Metafase II con un tiempo de maduración in vitro de 28 horas (Ratto et al, 2005); sin embargo, en dicho estudio se utilizaron tratamientos hormonales previos para inducir el crecimiento folicular, contribuyendo a la maduración in vivo de los ovocitos.…”

Section: Resultados Y Discusiónunclassified

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Evaluación de Cuatro Tiempos de Cultivo sobre la Tasa de Maduración y División Post-Fecundación in vitro de Ovocitos de Alpaca

Huanca

Condori

Chileno

et al. 2014

Rev. investig. vet. Perú

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RESUMENSe evaluó el efecto del tiempo de cultivo sobre la tasa de maduración nuclear y tasa de división posfecundación a 72 horas de ovocitos de alpacas. Complejos CumulusOvocitos (CCOs) fueron obtenidos de ovarios procedentes de animales beneficiados en el camal y transportados a 35 °C en solución salina 0.9% suplementada con antibiótico antimicótico. Los CCOs fueron aspirados de folículos de 2 a 6 mm. Experimento 1: 502 ovocitos fueron distribuidos en cuatro tiempos de maduración (30, 34, 38 y 42 horas) y madurados en TCM-199 suplementado con 10% suero fetal bovino (SFB), 0.5 µg/mL de FSH, 10 µg/mL de hCG, 0.2 mM de piruvato de sodio, 50 µg/mL de gentamicina y 1 µg/mL de E2, y cultivados a 39 ºC bajo una atmósfera de 5% de CO 2 y alta humedad. Posteriormente, los ovocitos fueron removidos, lavados con PBS suplementado con 10% de SFB y 1 mg/ml de hialuronidasa y fijados en solución de etanol y ácido acético (3:1). Los ovocitos fueron colocados en portaobjetos, teñidos con 1% de orceína y examinados bajo un microscopio a 400x para determinar la maduración nuclear. Experimento 2: 533 ovocitos fueron cultivados bajo las mismas condiciones del experimento 1 y fecundados con espermatozoides obtenidos de epidídimos. Los espermatozoides fueron centrifugados a 700 g en una gradiente de Percoll discontinua (22.5:45%) por 25 minutos. El sobrenadante fue removido y el pellet (con espermatozoides viables) reconstituido con TL-Stock. Los gametos fueron co-cultivados por 18 horas a 39 ºC con 5% de CO 2 en KSOM suplementado con 10% de SFB, 2 mM de piruvato de sodio y 50 µg/mL gentamicina, y evaluados

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Section: Resultados Y Discusiónunclassified

“…Los ovocitos de los camélidos presentan características propias, con un citoplasma oscuro, atribuido a la presencia de gotas de lípidos (Del Campo, 1994, citado por Ratto et al, 2005).…”

Section: Introductionunclassified

Evaluación de Cuatro Tiempos de Cultivo sobre la Tasa de Maduración y División Post-Fecundación in vitro de Ovocitos de Alpaca

Huanca

Condori

Chileno

et al. 2014

Rev. investig. vet. Perú

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“…[3][4][5][6][7][8][9][10][11] The methods used to obtain cumulus oocyte complexes (COCs) are aspiration or dissection of follicles from slaughterhouse ovaries; aspiration of follicles surgically exposed during a laparotomy (llamas; alpacas); and ultrasound-guided transvaginal aspiration of follicles.…”

Section: In Vitro Embryo Productionmentioning

confidence: 99%

Embryo Preservation and in Vitro Production of Embryos

Trasorras¹,

Giuliano²,

Miragaya³

2014

Llama and Alpaca Care

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“…Se recolectaron en promedio 3.5 complejos ovocito-cumulus (COCs) por ovario, recuperándose 667 COCs, y siendo seleccionado el 69% de ellos como apto para la maduración in vitro. Se consideraron como aptos cuando tenían dos o más capas de células de la granulosa rodeando al ovocito y con un citoplasma de color homogéneo, siendo descartados los ovocitos con cúmulo expandido, parcial o totalmente desprovistos de células de la granulosa (Ratto et al, 2005).…”

Section: Materiales Y Métodos Colección Y Maduración De Complejos Ovounclassified

ACTIVACIÓN QUÍMICA DE OVOCITOS DE ALPACA VITRIFICADOS DESPUÉS DE LA MADURACIÓN in vitro.

et al. 2011

Rev. investig. vet. Perú

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In vitro and in vivo maturation of llama oocytes

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Evaluación de Cuatro Tiempos de Cultivo sobre la Tasa de Maduración y División Post-Fecundación in vitro de Ovocitos de Alpaca

Evaluación de Cuatro Tiempos de Cultivo sobre la Tasa de Maduración y División Post-Fecundación in vitro de Ovocitos de Alpaca

Embryo Preservation and in Vitro Production of Embryos

ACTIVACIÓN QUÍMICA DE OVOCITOS DE ALPACA VITRIFICADOS DESPUÉS DE LA MADURACIÓN in vitro.

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