Impact of Lyophilisation on Integrity of Structural and Functional Characteristics of Human Cord Blood Leukoncentrate

Abstract

Реферат: Исследовали влияние условий лиофилизации на структурно-функциональные характеристики лейкоконцентрата кордовой крови человека (ЛККЧ): количество и жизнеспособность, цитоморфологические показатели, содержание гемопоэтических стволовых (CD34 +) и Т-регуляторных клеток (CD4 + CD25 high), кроветворных колониеобразующих единиц в культуре (КОЕк). Для лиофилизации клеток ЛККЧ использовали четыре режима, включающие две программы с применением 3,5% ДМСО и без него. Программы отличались значением температуры и длительностью, при которых проводили первичное высушивание. При использовании первой программы клетки высушивали в течение 10 ч (-28ºС), второй программы-9 ч (-18ºС). Разработанный метод лиофилизации ЛККЧ, который предполагал использование первой программы без ДМСО, обеспечил сохранность клеток в гетерогенной популяции кордовой крови по всем исследуемым характеристикам. Ключевые слова: лиофилизация, лейкоконцентрат кордовой крови человека, колониеобразующие единицы, гемопоэтические стволовые клетки, Т-регуляторные клетки. Реферат: Досліджували вплив умов ліофілізації на структурно-функціональні характеристики лейкоконцентрату кордової крові людини (ЛККЛ): кількість і життєздатність, цитоморфологічні показники, вміст гемопоетичних стовбурових (CD34 +) і Т-регуляторних клітин (CD4 + CD25 hіgh), кровотворних колонієутворюючих одиниць у культурі (КУОк). Для ліофілізації клітин ЛККЛ використовували чотири режими, що включають дві програми із застосуванням 3,5% ДМСО й без нього. Програми відрізнялися значенням температури й тривалістю, при яких проводили первинне висушування. При використанні першої програми клітини висушували протягом 10 годин (-28ºС), другої програми-9 годин (-18ºС). Розроблений метод ліофілізації ЛККЛ, що передбачає використання першої програми без ДМСО, забезпечив схоронність клітин у гетерогенній популяції кордової крові за всіма досліджуваними характеристиками. Ключові слова: ліофілізація, лейкоконцентрат кордової крові людини, колонієутворюючі одиниці, гемопоетичні стовбурові клітини, Т-регуляторні клітини.

Cord Blood as a Corrector of Hematological and Cytomorphological Characteristics of Lymphohemopoietic Organs in Experimental Atopic Dermatitis

“…Сьогодні з метою довгострокового зберігання ПКЛ для подальшого застосування в медичній практиці розробляються та впроваджуються методи її кріоконсервування та ліофілізації [30][31][32]. У зв'язку з цим увагу привертає порівняльна оцінка коригувального потенціалу кріоконсервованих (кЛПКЛ) і ліофілізованих (лЛПКЛ) форм лейкоконцентрату ПКЛ щодо деяких показників периферичної крові та цитоморфологічних характеристик органів ІС при експериментальному АД у щурів.…”

“…Вище згадувалося про здатність МСК реалізувати імуносупресивні ефекти, до того ж застосування МСК, отриманих із ПКЛ, полегшує симптоматику АД [81]. ЛПКЛ також збагачений субпопуляцією регуляторних Т-(Tregs) і В-клітин (Bregs), які секретують протизапальний інтерлейкін-10 (IL-10), здатний блокувати імунну відповідь Т-клітин [30,95]. Водночас ПКЛ містить ДК із більш незрілим фенотипом (tolDK) і зниженою здатністю вивільняти запальні ФНП- та ІФН- порівняно з ДК, що походять із периферичної крові дорослої людини [96].…”

The Role of Cord Blood in the Regulation of the Cellular and Humoral Link of Immunity in Experimental Atopic Dermatitis

“…Встановлено, що деякі режими ліофілізації, в т.ч. і застосовані в цій роботі, можуть чинити селективний вплив на певні субпопуляції клітин кордової крові, підвищуючи вміст клітин Т-reg [27]. Володіючи зазначеною вище проліферативною активністю, вони при введенні в організм можуть зумовлювати збільшення пулу клітин Т-reg у селезінці при використанні ліофілізованого матеріалу в тварин із АД, чого не спостерігалося при застосуванні кЛККЛ.…”

“…Поліфункціональність лейкоконцентрату кордової крові людини (ЛККЛ) у клінічній практиці визначила необхідність розробки ефективних методів його консервування (ліофілізація, кріоконсервування) з метою тривалого зберігання. При цьому важливо, що ці методи можуть виступати в ролі модифікатора стану біо-обʼєкта на молекулярному і клітинному рівнях, у низці випадків покращуючи його терапевтичну ефективність [26,27]. Наприклад, метод ліофілізації здатний збагачувати ЛККЛ унікальною субпопуляцією T-reg [27], особлива роль яких у мінімізації прояву АД була відзначена вище.…”

“…При цьому важливо, що ці методи можуть виступати в ролі модифікатора стану біо-обʼєкта на молекулярному і клітинному рівнях, у низці випадків покращуючи його терапевтичну ефективність [26,27]. Наприклад, метод ліофілізації здатний збагачувати ЛККЛ унікальною субпопуляцією T-reg [27], особлива роль яких у мінімізації прояву АД була відзначена вище.…”