Identification and characterization of a putative agglutination/immobilization antigen on the surface ofCryptocaryon irritans

Abstract

The ciliated protozoan Cryptocaryon irritans, a parasite of seawater fishes, was found to express an antigen that elicits antibodies in rabbits and tiger puffer (Takifugu ruburipes). Serum from rabbits and fish immunized with theronts had agglutination/immobilization activity against theronts in vitro; fish serum antibody levels (measured by enzyme-linked immunosorbent assays: ELISA) correlated with this activity. Anti-theront antibody levels in fish were significantly higher in the immunized group as compared with control fish at 2 weeks after booster immunization (injection of bovine serum albumin; Student's t-test, P<0.01). Biochemical analyses indicated that a Triton X-114-soluble 32 kDa theront integral membrane protein may be the agglutination/immobilization antigen. Indirect immunofluorescence staining of theronts suggested that this 32 kDa antigen was expressed on the surface of cilia. The full-length 32 kDa antigen cDNA contained 1147 basepairs, encoding a 328-amino acid protein including hydrophobic N- and C-termini. As with Tetrahymena and Paramecium spp., TAA and TAG appear to be used as glutamine codons in the 32 kDa antigen gene.

Immune protection of Mozambique tilapia (Oreochromis mossambicus) exposed to different infectious doses of ectoparasite (Cryptocaryon irritans)

“…The immobilization titres were significantly boosted after the secondary exposure in all groups. These results suggest that levels of i-antigen specific antibody were significantly increased following the secondary exposure because the i-antigen specific antibody interferes with movement of cilia and causes immobilization of C. irritans (Hatanaka et al 2007). …”

Perbandingan Filogenetik Protein Antigen-I yang Berpotensi Sebagai Calon Diagnostik dan Vaksin terhadap Parasit Cryptocaryon irritans

“…Antigen-i ditemui hadir pada silia C. irritans pada peringkat kitar hidup trofon dan teron. Antibodi yang dihasilkan terhadap antigen ini didapati memberi perlindungan kepada perumah semasa jangkitan parasit tersebut serta menyebabkan aglutinasi dan immobilasi silia parasit dalam asai aglutinasi (Bai et al 2008;Hatanaka et al 2007).…”

“…Penanda molekul yang dikenal pasti boleh digunakan untuk menyaring stok ikan yang baru sebelum ianya dimasukkan ke dalam sangkar laut atau menentukan kemungkinan kehadiran parasit tersebut dalam sistem marikultur secara berkala. Kajian ini bertujuan untuk menganalisa pelbagai antigen-i yang pernah dilaporkan (Hatanaka et al 2008(Hatanaka et al , 2007Josepriya et al 2012 (Thompson et al 1997). Kaedah maximum parsimony (MP) dilakukan menggunakan perisian PHYLIP (Felsenstein 1989) melalui satu siri analisis yang berturutan menggunakan PROTPARS dan CONSENSE diikuti dengan penjanaan pohon-pohon MP menggunakan MEGA4 (Tamura et al 2007).…”

“…Pengkelompokan antigen-i isoform 1 hingga 5 C. irritans serotip G32 (Hatanaka et al 2007) dalam satu kumpulan yang berbeza daripada jujukan antigen-i G37 (CISA-37) C. irritans serotip G37 menyokong penemuan Hatanaka et al (2008) bahawa kedua-dua serotip C. irritans tersebut mengekspreskan antigen-i yang berlainan dan antibodi daripada ikan yang diimunisasi dengan antigen-i serotip C. irritans tertentu tidak memberi perlindungan saling terhadap antigen-i daripada serotip lain. Pengkelompokan kesemua antigen-i serotip G32 ke dalam kelompok yang sama tetapi berbeza daripada jujukan antigen-i yang lain dalam klad I disokong dengan nilai butstrap 99% dan kebarangkalian posterior 99.…”

“…Kajian ini dan kajian Hatanaka et al (2007) telah menunjukkan bahawa antigen-i hadir pada semua peringkat C. irritans. Oleh itu, dicadangkan antigen-i sesuai dikaji selanjutnya sebagai sasaran diagnostik dan calon vaksin bagi pengesanan dan kawalan jangkitan C. irritans.…”