Identificación de antígenos de quistes y trofozoítos de aislamientos colombianos de Giardia duodenalis reconocidos por IgA.

Abstract

Se conoce poco acerca del papel de la IgA en la respuesta inmune de la giardiosis. El propósito de este trabajo fue identificar los antígenos estimuladores de la producción de IgA anti-Giardia duodenalis de aislamientos colombianos del parásito. Se realizó separación de proteínas de quistes y trofozoítos mediante SDS-PAGE y su antigenicidad se determinó por electroinmunotransferencia. El perfil de proteínas de quistes mostró 24 proteínas en un rango de 23-270 kDa sin 2-mercaptoetanol (2-ME) y 35 polipéptidos en un rango de 22-241 kDa con 2-ME. Los trofozoítos revelaron 16 proteínas en un rango de 24-270 kDa sin 2-ME y 45 proteínas en un rango de 18-241 kDa con 2-ME. La identificación de 20 y 29 antígenos en quistes y trofozoítos de G. duodenalis, respectivamente, permite sugerir que los aislamientos colombianos de G. duodenalis pueden inducir una respuesta inmune humoral específica en el hospedero. Los antígenos de 31, 57, 110, 133 y 170 kDa reconocidos por IgA anti-Giardia simultáneamente en quistes y trofozoítos son compartidos con aislamientos de Giardia circulantes en otras regiones geográficas mientras que los de 35, 38, 43, 45, 49, 52, 60, 62, 65, 72, 82, 99, 145, 155 y 185 kDa son específicos de los aislamientos colombianos. Esto sugierer que los antígenos de 57, 65, 145 y 170 kDa, reconocidos por IgA anti-G. duodenalis en quistes (frecuencias entre 82% y 98%) y trofozoítos (frecuencias entre 86% y 97%), podrían ser los más indicativos de infección.Palabras clave: giardiosis, antígenos, inmunoglobulina A, inmunoelectrotransferencia. Cyst and trophozoite antigen identification in Colombian Giardia duodenalis isolates recognized by IgALittle is known about the role of IgA in the immune response against Giardia duodenalis infection. The current study identified the antigens of Colombian G. duodenalis isolates which stimulate the production of IgA anti-G. dudoenalis. Cyst and trophozoite stage proteins were separated by SDS-PAGE and their antigenicity was determined by Western blot. Without 2-mercapto ethanol (2-ME), the protein profile of the cyst stage showed 24 proteins within a molecular weight range of 23-270 kDa; with 2-ME, 35 polypeptides ranging from 22 to 241 kDa were distinguished. The trophozoite stage protein profile without 2-ME was formed by 16 proteins within the range of 24-270 kDa; with 2-ME, 45 proteins were present between 18 and 241 kDa. The identification of 20 and 29 antigens from the cyst and trophozoite stage, respectively, suggested that G. duodenalis stimulates a specific humoral immune response in the human host. The antigens of 31, 57, 110, 133, and 170 kDa recognized by anti-G. duodenalis IgA in both cysts and trophozoites corresponded with G. duodenalis isolates from other geographic regions, whereas those of 35, 38, 43, 45, 49, 52, 60, 62, 65, 72, 82, 99, 145, 155, and 185 kDa seemed specific to Colombian isolates. This indicated that antigens of 57, 65, 145, and 170 kDa, recognized by anti-G. duodenalis IgA antibodies in cysts (with frequencies between 82% and 96%) and trophozo...