Identificação e caracterização de variantes novas e raras da hemoglobina humana

Abstract

As anormalidades estruturais da hemoglobina estão entre as doenças genéticas mais comumente encontradas nas populações humanas.

α-chain hemoglobin variants with electrophoretic mobility similar to that of hemoglobin S in newborn screening programs

“…The former include Hbs D, Lepore, Korle-Bu, Osu-Christiansborg and Zürich (13,14) , and the latter Hbs Hasharon, Stanleyville-II, G-Pest, Sunshine Seth, G-Philadelphia, West One and Daneshgah-Tehran (8,9,14) . In the case of the α-chain variants, some technical characteristics can help with the diagnosis; these include the presence of four bands in electrophoresis - two corresponding to Hb A 2 (A 2 and A 2 ') and two to Hb A (A and 'X') - and a lower concentration of 'Hb X' than normally observed in individuals with β-chain variants.…”

Caracterização fenotípica do camundongo BALB/c mutante anêmico

“…A expressão clínica das variantes de Hb instável é bastante variável. Em alguns casos, pode ocorrer anemia crônica grave persistente, enquanto em outros quadros pode ocorrer uma discreta hemólise, que pode ser agravada apenas se houver exposição a drogas oxidantes ou infecções (WILLIAMSON, 1993;LUKENS, 2004;KIMURA et al, 2008).…”

“…Para triagem, em protocolos sugeridos por Naoum (1997) e Kimura et al (2008), realiza-se a eletroforese de hemoglobinas em acetato de celulose em pH alcalino e cromatografia líquida de alta performance (HPLC -high performance liquid chromatography) de troca catiônica, que permite a quantificação da fração anômala e das Hb A2 e Fetal.…”

“…Depois de detectadas, são submetidas à eletroforese em gel de ágar em pH ácido; aos testes de solubilidade e estabilidade: térmica, em n-butanol e em isopropanol; análise de cadeias globínicas por eletroforese ou HPLC de fase reversa -RP-HPLC; investigação de corpúsculos de Heinz e de inclusão ( NAOUM, 1997;KIMURA et al, 2008).…”

“…Uma vez identificada a cadeia mutante, o gene correspondente é então seletivamente amplificado (por PCR -reação em cadeia da polimerase) e sequenciado. Associa-se ainda, à análise familial (KIMURA et al, 2008).…”