Objetivos: A resistência dos microrganismos perante o uso indevido dos fármacos é atualmente um dos problemas de saúde pública, tornando-se necessárias pesquisas sobre compostos naturais com atividade antimicrobiana, como a Casearia sylvestris. Este estudo objetivou avaliar a atividade antimicrobiana do extrato glicólico de Casearia sylvestris sobre cepas-padrão de Candida albicans (ATCC 18804) e Candida glabrata (ATCC 9030) em cultura planctônica, verificando a concentração inibitória mínima e concentração microbicida mínima (CIM e CMM) e também sua ação sobre biofilmes. Metodologia: O extrato glicólico de C. sylvestris, de origem comercial, foi obtido na concentração de 200 mg/ml (20%) eluídos em 80% de propilenoglicol. Os valores da CIM e CMM foram determinados pelo método de microdiluição em caldo, segundo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), normas M27-A2, com modificações. Logo, foram iniciados os testes em biofilmes monotípicos de 48h, com troca de caldo a cada 24h, destes micro-organismos. Após submetido aos tratamentos o biofilme foi preparado para o teste metabólico de MTT. Resultados: Candida albicans apresentou CMM em 50 mg/mL, em Candida glabrata não observou-se CIM e CMM. No teste de MTT os resultados mostraram efetividade da concentração de 25 mg/mL sobre Candida glabrata, com redução de ≥ 29%, em Candida albicans não observou-se resultados significativos nas concentrações analisadas. Conclusão: O extrato apresentou efeito antimicrobiano contra os gêneros testados. Salienta-se também a importância de testes in vitro e in vivo que corroborem os resultados apresentados, com finalidade de aumentar o embasamento da aplicação do extrato.