High Performance of ELISA test using recombinant rLiNTPDase2 from Leishmania infantum: a Phase II diagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis

Souza, Anna Cláudia Alves de; Castro, Raissa Barbosa de; Santos, Yaro Luciolo dos; Pavione, Nancy da Rocha Torres; Agripino, Joice de Melo; Bahia, Maria Terezinha; Machado-Coelho, George Luiz Lins; Souza, Ronny Francisco de; Oliveira, Leandro Licursi de; Souza, Celeste da Silva Freitas de; Bressan, Gustavo Costa; Vasconcellos, Raphael de Souza; Almeida, Márcia Rogéria de; Fietto, Juliana Lopes Rangel

doi:10.1016/j.actatropica.2020.105535

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“…While different diagnostic tests are available, such as microscopic examination, culture, serology, and molecular methods, the diagnosis of CVL still remains unsatisfactory [ 11 – 14 ]. Culture technique is time-consuming, invasive and labor-intensive, microscopic analysis requires trained laboratory professionals and lacks sensitivity [ 5 , 10 ].…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

A comparative study of nested-PCR and direct agglutination test (DAT) for the detection of Leishmania infantum infection in symptomatic and asymptomatic domestic dogs

et al. 2021

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Objective Canine visceral leishmaniasis (CVL) is the main source of human visceral leishmaniosis (HVL) in Mediterranean region, including Iran and is spread from domestic dogs to Phlebotomine sand flies vectors to humans. To control the transmission of HVL, early and accurate detection of infected dogs is paramount importance despite it remains a confronting challenge. Herein, we evaluated the performance of direct agglutination test (DAT) against gold standard nested polymerase chain reaction (nested-PCR) for CVL diagnosis in symptomatic and asymptomatic domestic dogs from endemic areas of Iran. Results Venous blood samples were collected from dogs without clinical signs (n = 30) and with clinical signs (n = 35) suggestive of Leishmania infantum infection. Among 65 samples examined, Leishmania DNA was detected by nested-PCR in 89.23% (58/65). Furthermore, 86.15% (56/65) nested-PCR positive samples were also DAT positive. The results of the DAT sensitivity test were 96.43% and 96.67% in symptomatic and asymptomatic dogs, respectively, while the specificity was 100.00% and 60.00% in symptomatic and asymptomatic dogs, respectively. The results of this study also pointed out substantial concordance between DAT test and nested-PCR method in both symptomatic dogs (Κ = 0.783; P < 0.001) and asymptomatic dogs (Κ = 0.618; P < 0.001). Thus, DAT represents as a simple and economic tool for initial diagnosis of CVL particularly in endemic areas of the disease.

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Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

A comparative study of nested-PCR and direct agglutination test (DAT) for the detection of Leishmania infantum infection in symptomatic and asymptomatic domestic dogs

et al. 2021

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“…A rLicNTPDase-2 foi expressa recombinante em sistema bacteriano, tendo bom potencial para uso em diagnóstico sorológico de LVC por ELISA (DE SOUZA et. al., 2012;DE SOUZA et. al., 2020).…”

Section: Lista De Ilustraçõesunclassified

“…Já Costa (2020) afirma que o controle do reservatório canino não está sendo suficiente para interromper a transmissão da LVC, pois a realização da eutanásia traz questões éticas e emocionais para profissionais e tutores, além de apresentar complexidade operacional e altos custos. Esses fatores reforçam a recusa dos donos de cães na participação nos inquéritos e na entrega de cães infectados para eutanásia, levando a baixas coberturas de inquérito canino (7 a 8%).…”

Section: Inquérito Canino/tratamento E Eutanásiaunclassified

“…De Souza e colaboradores (2012) em estudos de fase I, utilizaram amostras LVC-positivas, amostras negativas para leishmaniose e amostras de cães infectados com T. cruzi, encontrando alta sensibilidade e especificidade com valores respectivos de 100% (IC 95% = 92,60-100,0%) e 100% (IC 95% = 86,77-100,0%). Já um estudo de Fase II utilizando 651 amostras, rLicNTPDase2-ELISA apresentou alta sensibilidade (92,6%) e alta especificidade (88,5%) usando amostra padrão ouro (padronizadas por teste parasitológico e PCR) e ao ser comparado seu desempenho com os ensaios diagnósticos preconizados pelo MS para o diagnóstico da LVC, foi observado alto grau de concordância com IFI-LVC-Bio-Manguinhos (88,6%), e com IFI-LVC-Bio-Manguinhos acoplado a EIE LVC-Bio-Manguinhos (82,9%) ( de SOUZA et. al., 2020).…”

Section: Ecto-nucleotidases Da Família E-ntpdase/rlicntpdase-2unclassified

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Desenvolvimento de um imunoensaio cromatográfico rápido de fluxo lateral para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina, utilizando antígeno recombinante otimizado de Leishmania infantum

Andrade

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A Leishmaniose Visceral é uma doença negligenciada que acomete populações em países de clima tropical e subtropical. O Brasil encontra-se entre os seis países com maior registro de novos casos no mundo. Os cães têm importante papel no ciclo de transmissão da leishmaniose, atuando como reservatório dos parasitos, uma vez que são suscetíveis à infecção e convivem próximos aos seres humanos. Apesar de existir um medicamento para tratamento da Leishmaniose Visceral Canina (LVC), o Programa de Controle da Leishmaniose Visceral (PCLV) do Ministério da Saúde, determina como uma das estratégias para controle e erradicação da doença o controle do reservatório canino através de inquérito sorológico seguido à eutanásia de cães sororreagentes. O inquérito sorológico tem se mostrado uma estratégia falha, no que se refere a eutanásia em cães sororreagentes e ao uso do TR DPP® LVC preconizado pelo MS para o diagnóstico da LVC. Dessa forma ainda é necessário o desenvolvimento de novos imunoensaios cromatográficos rápidos (LFIA) com melhor performance para evitar diagnóstico impreciso dos cães e melhorar o programa de controle da LVC. O antígeno alvo deste trabalho foi previamente caracterizado como bom antígeno recombinante para ensaio diagnóstico indireto de LVC por ELISA. Neste trabalho este antígeno foi otimizado in sílico, produzido de forma recombinante. Foram realizados testes com propósito produzir, estabilizar e avaliar a funcionalidade da proteína como antígeno no diagnóstico indireto por imunocromatografia. Nos testes de adsorção, o antígeno purificado foi capaz de formar ligações estáveis ao ouro coloidal e em testes preliminares de ensaio ELISA e tiras LFIA a proteína otimizada se mostrou um antígeno funcional, pois anticorpos específicos presente em amostra de soro de cão positiva para LVC, reconheceram e reagiram com a rLicNTPDase2-Gold. Palavras-chave: Leishmaniose visceral canina. Ensaio diagnóstico indireto. LFIA. Antígeno recombinante otimizado.

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Heterologous expression and biochemical characterization of the recombinant nucleoside triphosphate diphosphohydrolase 2 (LbNTPDase2) from Leishmania (Viannia) braziliensis

da Rocha Torres Pavione,

de Moraes,

Ribeiro

et al. 2023

Purinergic Signalling

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High Performance of ELISA test using recombinant rLiNTPDase2 from Leishmania infantum: a Phase II diagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis

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A comparative study of nested-PCR and direct agglutination test (DAT) for the detection of Leishmania infantum infection in symptomatic and asymptomatic domestic dogs

A comparative study of nested-PCR and direct agglutination test (DAT) for the detection of Leishmania infantum infection in symptomatic and asymptomatic domestic dogs

Desenvolvimento de um imunoensaio cromatográfico rápido de fluxo lateral para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina, utilizando antígeno recombinante otimizado de Leishmania infantum

Heterologous expression and biochemical characterization of the recombinant nucleoside triphosphate diphosphohydrolase 2 (LbNTPDase2) from Leishmania (Viannia) braziliensis

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